然而，将之作为甜味与甜味剂理论一种极有效素材的研究工作仍在进行之 中，因为自然界中具有变味作用的天然化合物中只有奇异果素这一种效果最明 显，研究文献也比较多。奇异果素糖蛋白分子中所隐含的神秘变味机理，仍呼唤
图2 -2所示为阿斯巴甜的2种分解途径，图2 - 3所示为主要的分解产物。 干燥的阿斯巴甜稳定性很好，只有在极端高温条件下（>15(TC)才会发生环化 作用，分解率可用阿斯巴甜转化成DKP的数里來表示。在105T、120T和 150T下干燥阿斯巴甜的稳定性如阁2 -4和表2 - 1所示。
阿斯巴甜的人体试验方面的研究表明，正常成人、儿童和靑年人对阿斯巴甜 有很强的耐受力。有人作了短期（6周）和长期（12周）的人体临床试验，摄 取数量为1. 8g/d,结果并没发现任何不良作用。
转糖苷反应产物的影
采用电穿孔法，将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究，酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小，使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体（4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度），进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为：2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂，使细胞对渗透压更敏感，因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基，也不能得到CYH抗性菌落，需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后，再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
尽管许多国家组织相继发表大量评论，明确表示甜诳素为安全物质，但0 前世界上对甜蜜索的安全性仍存在争议。美国FDA至今也没有最终的明确答 案。世界上有包括美国、日本等国在内的40多个国家仍规定禁止使用甜蜜素 作为髙效甜味剂。但中国、欧盟、澳大利亚、新西兰、南非等80多个国家均 允许使用。
选用三苯中基化和乙酰基化反应，来完全保护蔗糖的8个羟基。具体操作方 法是，在500mL圆底烧瓶中，依次加人20g蔗糖粉（0.058mol)和80mL 二甲基 屮酰胺，磁力搅拌并升温至50?65T使蔗糖完全溶解，再加入24g/V-甲基吗啉 (0.236mol)。分3次在3h内加人56. 8g三苯基氣甲烷（0. 197mol)，恒温反应 3.0-4. 5h0
发酵完成后，为了从去除干物质的培养基上清液中有效地提取出G -6 - a, 人们试验了多种溶剂，包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和1 -丙醇等。其中， 甲醇是G-6-a最有效的溶剂，但它同时也会溶解一些葡萄糖，因此要得到纯 净的G-6-a，还必须利用色谱进行进一步分离。以硅胶为固定相，用丙酮对甲 醇提取液进行洗脱可以从中分离出葡萄糖和G -6 - a两个成分并得到纯度为 80% ~85% 的 G-6-a。
