图3-4三氣蔗糖水溶液的黏度
曾尝试在大肠杆菌中表达重组奇异果素。在表达载体中插人以化学法合成的 奇异果素基因，所得的载体即转化成大肠杆菌菌株HB101。尽管通过SDS - PAGE和Western印迹分析可检测到重组奇异果素的存在，但是，所得的通组奇 异果素并不具味道修饰作用。在酵母和转基因烟草中的尝试结果也一样，尽管都 成功地表达出了重组奇异果素，但是产物也不具备甜味诱导活性。
图2-21分別表示Z-Asp、PheOMe、Z - Asp - PheOMe的尺值，和饱和乙 酸乙酯水溶液pH关系曲线。P和p尺值固定时，试验结果和由式（2-22)?式 (2-24)算得的结果相吻合（曲线表示计算结果）。表2-6列出以乙酸乙酯为 有机溶剂时不同物质的P和pA：值，P值反映了各物质和有机溶剂相互作用的程 度。表2-6还列出用氣仿和二氣乙烷为有机溶剂时测得的P值。二相体系中的 合成速率可通过速率等式（2-19) ~式（2-21)和分配系数计算式(2-22) ~ 式（2-24)求得。
各质粒的启动子分别是：zlcre/no/iium chrysogenum的B2广谱醋酶基因 (cesB )的后动子(pBKThb )、PeniciUium chrysogenum的异青毎素合成酶 (pcbC)启动子（pCKThb)、Aaimmon的谷氨酸脱氢酶基因（gdhA)后动子 (pGDTli)和/的3 -磷酸甘油醛脱氢酶基因（gpdA)启动子 (pGPTh)。各质粒$至经ble标记选择得到的/l.a?;amon>/66菌株，该菌株没有 曲霉蛋白酶 A (aspergillopepsin A, PepA)活性。
Van der Wei等人的研究表明，T. danieUii (TD)假种皮的水提取物主要含 有两种蛋白质，称为嗦吗甜I (T丨）和嗦吗甜II (T_)。Higginbotham等人对 TD所含其他次甜的蛋白质做了研究。1979年首次分析出T,的氨基酸顺序， 它是一条含有207个氨基酸的单链，由8个二硫键交联起来。应用凝胶色谱法 测定其相对分子质萤为21000，根据已知氨基酸计算出来的精确相对分子质量 为22209。它的竣基与氨基末端均为丙氨酸，没有异常的氨基酸、侧链取代 基、键合或末端变性等现象。在通常食物常见的氨基酸，只有一种组氨酸是它 所没有的。1982年Edens等人报道了嗦吗甜D氨基酸分析结果，认为嗦吗甜 II蛋白的氨基酸总数目与嗦吗甜I 一样，只是在46、63、67、76和丨丨3等5 个位罝上的氨基酸与嗦吗甜I不同（表5-2)。嗦吗甜n的精氨酸、谷氨酰胺 与天冬氨酸分别比嗦吗甜I多1个，嗦吗甜n的天门冬氨酰比嗦吗甜丨多2 个，嗦吗甜I的丝氨酸比嗦吗甜n多1个（表5-3)。显然，这几种不同的氨 基酸并不是嗦吗甜的主要组成氨基酸，因为嗦吗甜I、嗦吗甜n两种蛋白质的 甜味特性十分相似。两种蛋白的等电点p/也相似，都在丨1.5?12. 5之间，具 体精确的测定尚有困难。根据嗦吗甜n的氨基酸组成可计算出其相对分子质量 为22293,稍大于嗦吗甜丨的数值。
①蔗糖C-4位羟基的构型对维持蔗糖分子的甜味很重要，因为半乳蔗糖没 有甜味而4 -脱氧蔗糖仍具有甜味。但蔗糖C -4位羟基经氣原子取代而转变为 氣代半乳蔗糖构型时，却对增甜作用具有重要意义，因为半乳蔗糖的衍生物都非 常甜。
用在非水溶性有机溶剂中的闶定化酶催化反应是二相反应体系的-个特例。 在该系统中，多孔载体内部空隙中的缓冲液和在载体外的有机溶剂组成r二相体 系。由于在载体内部的水相体积比有机相体积小，因此由式（2-17)知能增加 平衡常数。5.其他方法
反应体系中的葡萄糖副产物，以及约有超过40%未发生反应的G-6-a,可 以通过回收而敢新利用，吸附在DEAE-纤维素柱上的果糖转移酶，也可以通过 用O.5mol/L磷酸盐缓冲液洗脱而实现循环使用。但在反应过程中，利用树脂将
