由于各甜蛋白间只存在一些三肽序列相同,且它们连接抗体后就丧失了 甜味或变味特性,W此另外一些研究人员猜测一些氨基酸拉伸后参与形成能 被味觉识别器识别的结构。根据报道,仙茅蛋白分別和莫奈林、奇异果素和 嗦吗甜有2个、5个和6个相同的三肽,但免疫印迹分析结果表明,仙茅蛋 白的抗血淸只与奇异果素发生微弱的反应,而与嗦吗甜、莫奈林不发生反 应。假定这些推测的三肽是在分子表面,则它们应存在于5个完全铩露在表 面的环中:11 ~丨4、46~51、66 ~ 70, 76 -78, 106 ~ 109 0这些氨基酸序 列明显与没有甜味和变味特性的GNA不同。特别是,属于11~14、46~51 和66 ~70的氨基酸非常接近(1.50~1.60mn),能够构建一个一般的抗原 决定子(common antigenic determinant),它能使味觉接收器失效。另外,多 肽链折叠后,仙茅蛋白的AsP71和Tyi65靠近并暴寐在表面,并且形成一个 类似于阿斯巴甜的味点。
目前实现阿斯巴甜化学合成的具体途径有很多种,根据所用天冬氨酸衍生物 的种类,大致有以下3种。
(三)由G-6-a酶法合成S-6-a
(表 5-8>0 表S-8
图2 -92 带有芳香基闭取代基二肽甜味剂的分子结构
198丨年,FDA在广泛审查了科学家们的大规模安全资料之后,FDA委员 Arthur Hull Hayer对阿斯巴甜的食品添加剂地位予以认可。Hayer指出,从曰本来 的一项关于脑肿瘤的科学研究资料,坚定了他决定批准的信心。PBO丨主席后来 写信给Hayer表明,日本的研究數据坚定了专家们给予阿斯巴甜一个“无条件的 批准”的立场。
比较二种试验操作,后一种操作虽然可省去制冷设备,但其得率较低,也较 难提纯。更重要的是,由于糖苷键在酸性溶液中易断裂,温度越高,断裂越易发 生。综合考虑,采用第一种方法为好,既安全又高效。
现在国内外对Brazzein的研究主要表现在两个方面:一是利用基因工程技术 研究Brazzein基因结构和功能的关系以及Brazzein的热稳定性问题;二是利用基 因工程技术开发这一蛋白资源。而对甜味蛋内Brazzein的研究方式主要有三种: 一是在大肠杆菌中表达Brazzein; 二是在毕赤酵母中表达Brazzein;三是利用转
CaMV, 35SRNA 的 Cauliflower Mosaic vims 启动子。