X(% ) =? (l -JY] 100 (2-8)当底物浓度为0. lmol/L时，产物溶解度为0. lfim时，反应平衡得率也达 99.6%，几乎为定量反应。因此加保护基闭降低产物溶解度能够得到很高的平衡 得率，但保护基团必须能够很容易地从产物中脱去。表2 -5所示为几种最常用的保护基团及其稳定或脱去的一般条件。保护某 些肽的氨基的/V-苯乙酰基可用青霉素酰基转移酶（EC3.5. 1.11)催化
图4 - 10采用不同糖基供体进行甜菊苷转糖苷反应后，可经离心分离的 淀粉世及残留还原糖量比较 表示-O—和一醫一的A线重叠；
(四）反应惰性溶剂的选择
(五）莫奈林的提纯工艺
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素：间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时，固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时，起始反应速率低且酶不稳定；pH >6时，平衡得率急 剧下降。在大多数情况下，多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定， 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性，但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中，底物和产物浓度各处均 相等。
(二）C-6羟基化学保护法（单基团保护法}
用来改善提取产物风味的酶处理法，除了通过酶重组法转变甜菊苷成味觉特 性更好的甜菊双糖A苷外，还可以使用适当的糖基转移酶将蔗糖分子中的Glc或 Fru单元转移至甜菊苷或其他类似物分子上。例如，利用月-果糖基转移酶 (分-呋喃果糖苷酶）在甜菊苷分子旁接上lmol的Fru,转变成果糖基甜菊苷 (FmctosylStevia),其甜味特性得以改良，向庶糖的甜味靠近。利用a -葡糖基 转移酶，在甜菊苷分子旁接上1 mo丨的Glc,转变成a-葡糖基甜菊苷（Glucosyl Stevia),可使甜味特性改良，甜度是蔗糖的100 ~200倍，替代蔗糖的比例由原 来的20% -25% ,提髙到50% ~60%。表4-5所示为经过葡糖基转移酶处理前 后甜叶菊提取物的成分变化情况。
表2 -26 HPLC分析得到的纽甜产率1
3-47)
