用400U/g甜菊苷的酶量，在55T, pH6.5下搅拌反应12h,淀粉貴对转化 结果的影响见图4-8。
(五）脱乙酰基反应条件的优化
在单糖专-?性果糖转移酶的作用下，G -6 - a接受从蔗糖水解中产生的一个 果糖基单元，从而专一地合成S-6-a。反应体系通常含有蔗糖、G-6-a、磷 酸盐-柠檬酸盐缓冲液（PH6.0)和果糖转移酶。研究发现，当蔗糖与G-6-a 的摩尔比为2:1时，S-6-a的得率最高，而高浓度的G-6-a底物却可有效避 免因水解产生的果糖基转移到水相而造成的合成损失。
质粒pCLRM216、pRMll、pUMll的转化体，在lOmLYPD培养基中培养后, 均能产生莫奈林。凝胶定虽扫描表明，奐奈林在pUMll转化体中的表达世，超 过可溶蛋白的50%。以141基因为探针对转化体进行DNA印迹分析，测定 pCLKM216的整合拷贝数为10?丨丨，PRM丨丨为12~丨8，pUMll为20?22。经 DNA印迹分析，确走pKMH和pUMll中没有细菌序列。
甜菊(Stevioside)是从菊科孽本植物■Sfwia re6au<iiam2叶子中提取出来的 一种甜苷，这种植物原产于南美的巴拉圭和巴西，早在400多年前就被巴拉圭居 民用来制作甜茶。1905年由植物学家Bertmii命名为rebaudiana而一直沿用 至今。1955年开始人工苗圃栽培试验，1964年巴拉圭Enrigue de Gasperi从事甜 叶菊大田移植驯化获得成功。
糖精Saccharin,是从拉丁字母Saccharum转变而来的。它是1878年 C. Fahlherg和I. Remsen在Johns Fahlberg大学进行邻磺胺苯中酸氧化研究中发现 的。Fahlberg为此申请了美国专利319082。1884年美国、1885年英国和1899年 德国相继建厂生产。
菊双糖A苷的中间物质。
(二）莫奈林在酵母中的表达
60A突变体无论在何种酸碱条件下都无甜味，怛是，在更高的浓度下 (2. Omg/mL),这些突变体则能产生轻微的甜味。这就表明，组氨酸-30对天然 奇异果素和重组奇异果素味道修饰作用的发挥有取要意义。
