六、甜蛋白的作用机理
通过色谱分离得以纯化。
图3-37各种有机溶剂对TCR转化成三氣蔗糖的影响 Christopher Bennett等人齊对从从vinacea和思曲潘(A. niger )中获得的 ?-半乳糖苷酶，进行提高水解反应速度的试验，包括使用表面活性剂、增加离 子强度和提髙反应温度等。前两种方法均不成功，但发现当pH为5.0?5. 5、反 应温度为551时，酶的失活和反应速率处于最佳平衡状态。此时，歸.vinacea 中获得的a-半乳糖苷酶，对TCR水解反应的& =5.8mmol/L，最高速率
比如糖精、阿斯巴甜之类高效甜味剂的开始作用时间（onset times〉与蔗糖 不同，停止刺激后的甜味持久性也与之不同，其甜味质量也有所区别。这样，就 给人们提出这样一个问题：不同的甜味剂是否具有不同的甜受体？有人怀疑受体 的均匀性，认为没有专一性受体，而只有一般化的受体，即可能存在多种甜 受体有些精神物理学资料也支持存在几种不同甜受体这种观点。但味觉改性研 究，诸如用森林匙葜藤酸（gynmemic acid)去除掉所有类型的甜味后并不改变 其苦味特性的研究，表明公共受体存在的可能性更大些。Grosby等人和Price等 人认为同一受体上有不同的结合部位，并列举了数个理由来支持：①用蔗糖溶液（0.32rnol/L)洗舌后发现蔗糖甜度降低80%，用糖精溶液 (0.01mol/L)洗舌后发现其甜味减少55%，这表明同种甜味剂进入受体上同一 部位有饱和效应②蔗糖与甘氨酸混合后甜度比单一的强3 ~5倍，这说明不同类型的甜味削 进入不同部位有协同增效作用。③果糖能抑制甘氨酸的甜味，蔗糖或糖精能减少多种甜味剂的甜度，这又 表明多种甜味剂进入甜受体同一部位发生了竞争性抑制。④若有多种受体，則不同的甜味剂进入不同的受体，将没有竞争，其甜味 应有加和性而无协同增效性。但迄今尚未有这方面的验证，而电生理实验证明同 一受体可有不同的结合部位。⑤甘茶甜素和二氢查尔氓两类甜味剂都具有以下结构，但其空间专一性要 求各不相同。
系数表明，斥电子取代基会带来分子甜度的增加。这类取代基能增加酰胺氮原子 的氢键作用力，故可带来分子甜度的增加。前述的Fujino化合物具有很高的甜 度，这也可用方程式（2-32)来解释。在该类化合物中，两个酯基团的存在使 得o■?值增大，而2, 6-二甲基环己基和葑基酯上的甲基分支使得（％)2值增 大，W此增大了分子的甜度。
很有趣的是，改性化合物中硫代基SO-Na?竟是口感良好的甜分子甜蜜素 (Cyclamate) R-NHS03Na^ (R=环己基）中的一部分，由此可见，甜蜜素中 R基团被其他烷基或环烷基取代时，该分子的甜味仍然保留。
3,4-四甲基-3 -硫化三亚甲基氨和D -丙氨酸在硼氢化钠或硼氢化锂的催化 下进行还原反应。反应中，用硫酸、盐酸等来活化硼氢化钠或锂催化剂，可以提 高催化剂的反应活性，同时用甲酸或BOC对D-丙氨酸进行保护。还原反 应的产率也能达到90%以上。
(7)对大鼠和狗的研究表明它对肾上腺没有不良影响。
将峰值m分在pH8、2nnn0丨/Ltt妖的嚷堪丨丨丨烷盐酸绥冲液（经Ot排气） 稀释至2(^8/011^然后在4t：保持20h
用节杆菌MrtArofcocter sp. K-1)的芦-呋喃果糖苷酶，在40弋，pH6.5, 催化蔗糖和甜菊苷（S)或甜叶悬钩子苷（RU)的混合体系进行转糖苷反应2h， 对产物果糖基甜菊苷（S-F)和果糖基甜叶悬钩子苷（RU-F)分析发现，果 糖基以)8-2, 6糖苷键连接至底物19-竣基相连的葡糖基上。产物的味质变化 见表4-12，可以看出S-F的甜味特性与阿斯巴甜相当。呋喃果糖苷酶催化转糖基反应产物的味质
