梅江区三氯蔗糖
半乳糖苷酶水解TCR的速率，通常为水解棉籽糖的丨/ (50 ~ 100)。产 物抑制是一个可能的原因，因为半乳糖苷酶常常会受到半乳糖的抑制。另一 个原因可能是，由于自由的C -6位羟基对底物与酶活性部位的高效结合是必窬 的。酶活力降低的原因还可能是由于，位于糖苷键附近的f-Cl会阻碍酶的水 解作用。
(二）质粒构建
阁1 -16两个假设的甜味受体活性位点的模助(以甜味化合物为模而间接推算的）
一、莫奈林的化学结构
Hodge等人在大U形口袋区发现5种糖苷，即甘草甜素、柚背二氢査尔酮、 甜菊苷、新橙皮苷二氢查尔酮和Osladin等。它们含有多个AH、B单元，呈U 形三级结构，U字中部为疏水骨架，如图1-25所示。其抑制剂Gymnema具有 相同的骨架，但其上的6个一OH全被酯化，这表明甜受体也有与此互补的 穴位。甜分子中疏水侧链的长度与甜度有关，侧链的空间要求取决于其结合的 部位，故各甜味化合物的侧链长度限度也可作为研究受体的有利探针。应指 出的是最强刺激是针对脂膜的烃链C~9前段，故有刚性（：9疏水链的化合物 最甜。
嗦吗甜、莫奈林和Brazzein具有极高的甜度，PenUidin和马槟榔的甜度相 对弱些，奇异果素本身没有甜味，却可使酸味变成强烈的甜味，而Cimuilin (Neoculin)则既具有甜味，又有变味活性。PerUadiri实际上是非天然形态的交 联Brazzein分子，与Brazzein来源于同一植物，其详细内容可参考Brazzein 部分。
对4# -脱氧-卤代-三氣蔗糖模型进行分析，以3, - 0H/2 - 0作为 AHs/Bs,结果发现有六个取代部位，见图3-55。如三氣蔗糖一样，6 - 0H和 6' - C1形成的微弱分子内氢键有助于f -取代基和X丨之间形成色散键。而且， 甜度不仅与疏水性有关，还与取代基原子半径有关，半径越大，甜度越强， 如 H ( 0. lOOnm )、F ( 0. 135nm )、Cl (0. 180nm )、Br (0. 195nm )和 I (0.215nm)。因此，-取代基和X:结合的面积将影响甜味分子对受体蛋白的 吸引力，因此对甜度具有重要影响。亊实上，4'-取代基和X!结合将伴随着构 象变化，这是呋喃糖tT?环的假旋转和围绕分子间糖苷键C-l - 0-C-2'的轻微 转动造成的，而且6f-Cl将占据着受体结合部位的表面位置。
1.产物沉淀法如果在竣基端、氨基端或二者同时加上适当的保护基团，则产物肽的溶解度 下降，易从溶液中沉淀析出。而沉淀物对酶催化不敏感，因而可以增大得率。在 相同胺和竣酸浓度[S。]，产物溶解度为[S]且底物可溶时，平衡百分得率X 可用下式计算：
