埇桥区蔗糖素
环糊精葡糖基转移酶(CGTase)能将淀粉或环糊精的葡糖基经转葡糖苷作 用转移给其他糖元,因此,可用它催化淀粉或环状糊楮在甜菊苷的糖基上引入新 糖元。转葡糖基反应分2步进行:①由淀粉合成环糊精;②从环糊精转移葡糖 基至受体物质。
细胞90个。但PCLRE17的转化率很低,因此采用pCLRK16的CYH抗性基因或 经PCR得到相同基因用于莫奈林的表达。
另一个U:验操作是,将50gTRlSPA溶于150mL 二氣甲烷中,加人丨5mL甲 醇和12.5mL浓盐酸,在宰温下搅拌溶液4.5h,用树脂中和盐酸。在真空状态下 于室温蒸去二氣中烷和部分甲醇。加人丨20mL甲醇溶解浓缩物,搅拌30min后 再加6mL水,继续搅拌lOmin。过滤出27. 5g三苯基甲醇沉淀,滤液真空浓缩成 油状物,再加入80mL乙酸乙酯共沸以蒸去剩余水分。将油状物真空十燥过夜, 可得到26g产品。经产品分析,产物熔点为143?150^,与理论值相差较大, 说明产物中含有较多杂质,得率估计在70% ~80%之间。
图丨-33所示为MNEI和Brazzein的内部(与受体接触的部分)和外部(暴 露与溶剂的部分)的比较。MNE丨和Brazzein的等电点分别是9.0和6. 7。如图 1 -33所示,Brazzdn的负静电势大部分集中在其外部表面
基间二硫键是Neoculin异型二聚体相互连接的歌要条件。这样的结构特征使 Neoculin的结构有更大的可变性,并有助于Neoculin在实现构象剧烈变化的同时 保持其二聚体结构。综合观察结果——Neoculin溶解于纯水(pH 7.0)也能产生 轻微的甜味,研究人员推测,Neoculin的结构是处于开和合的动力平衡状态中 的,中性环境和酸性环境均会破坏Neoculin的这种平衡状态,使结构分别转向闭 合和打开的状态。但只有当分子处于打开状态,才可产生强烈的甜味作用。研究 人员还构建了 Neoculin与甜味受体——T1R2-T1R3的对接模型,并根据研究结 果猜测酸的介入会打破Neoculin的平衡状态而转向开的状态,从而发生配体-受 体相互作用。
0.体外代谢试验
纽甜和脱酯化纽甜可以通过机体的正常代谢很快从血浆中淸除(图2 - 51 >, 然后迅速且完全通过粪便和尿液排出体外,在体内没有积蓄。纽甜和脱酯化纽甜 在血浆中的半衰期大约分别是0.5h和2h,人和大多数动物在口服一个剂董的纽 甜之后,它们的血浆浓度高峰大约分別出现在0.5h和丨h以内。纽甜和脱酯化纽 甜在人体内的血浆浓度随剂蛩的增加而成比例地增髙(图2 -52)。
(四)辅助因素对产率的影响研究表明,在低熔点混合物中加入适宙:的有机溶剂能降低混合物的熔点,从 而提商酶反应的效率。图2-66所示为加入不同溶剂对反应产率的影响。其中, 加入二甲基亚砜(DMSO)和2-甲氧基乙酸乙酯(MEA>能使产率达到60%, 而辛醉和正己烷的加人使产率低于50%。这可能是因为疏水性的有机溶剂能够 改进和保持低熔点混合物的特性,从而能够促进酶反应的产率。图2 -66 不同辅助有机溶剂对反应产率的影响 注:有机溶剂都按丨5% (w/w)的比例加人,苄氧羰基-L-天冬氨酸二乙《和D-内氨酰胺分 别加人0.5mmOl, -胰凝乳蛋f*丨酶浓度为丨5% (w/w)和丨2% (w/w)的水,37?€下反庖丨Oh。表2-37同时加入DIV1SO和MEA作为低熔点混合物的辅助因子对反应产率的影响