勐海县低聚半乳糖
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构,其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸(pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外,其 余均相同,称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低,只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达,葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100,且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙,因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
PGK,的3-磷酸甘油ft启动子;
(1)嗜热菌蛋白酶(Thmnolysin)丨sowa等人发现一种金属蛋白酶——嗜 热菌蛋1^1酶(EC3. 4.24.4),可以催化侧链羧酸不带保护基团的Z - Asp和 PheOMe,合成阿斯巴甜前体A'’ -苄氧羰基-L -天冬氨酰-L -苯丙氨酸甲酯 (Z-ASp-PheOMe),见式(2-18〉。在所有关于酶法合成阿斯巴甜前体的报道 中,均采用嗜热菌蛋白酶催化。
需说明的是,本章集中讨论的数种人工合成甜味剂,指的是纯粹的人工合成 品,就连其合成原料都不是食品或食物的天然成分。这样单独列章的目的是为了 讨论上的方便,并不是说前面几章讨论的都是天然产品。事实上,前面讨论的部 分甜味剂品种,诸如阿斯巴甜、阿力甜和三氣蔗糖等,都属于合成产品范围内。 与本章不同的是,它们的合成原料,诸如天冬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸和蔗糖
CaMV, 35SRNA 的 Cauliflower Mosaic vims 启动子。
(1)两个谷氦酸1彡mGluRl的两个拟体的结合(钴合T活性态Aoc的闭合构象MOI.I的谷?酸占用 了 LB1和KB2丨?.的残茱;而钴合于打开构象M0L2的桴软酸只占用了 LB2上的残基)
二、甘草甜素的安全毒理学分析
在非均匀酶反应体系中还原糖含量约0.3g/L,而以液化淀粉为葡糖基供体 的传统反应体系中,该值约为8.0g/L。上述结果表明非均匀反应体系中转葡糖 基产物的分离纯化过程会明显简化。
二、嗦吗甜的物化性质