松桃县甜蜜素
图3-37各种有机溶剂对TCR转化成三氣蔗糖的影响 Christopher Bennett等人齊对从从vinacea和思曲潘(A. niger )中获得的 ?-半乳糖苷酶，进行提高水解反应速度的试验，包括使用表面活性剂、增加离 子强度和提髙反应温度等。前两种方法均不成功，但发现当pH为5.0?5. 5、反 应温度为551时，酶的失活和反应速率处于最佳平衡状态。此时，歸.vinacea 中获得的a-半乳糖苷酶，对TCR水解反应的& =5.8mmol/L，最高速率
甜味与苦味相对比值为50: 17。有人正在进行结构改性方面的研究，以期改良其 甜味特性，消除苦后味。结果表明，Phyllodulcin的3-羟基-4-甲氧苯基团对 维持甜味十分重要，但酚羟基及内酯基团的消除对维持甜味没有影响。
如图3-35所示，棉籽糖可以看作是萠糖的半乳糖衍生物，是一种三糖分 子。由于棉籽糖的半乳糖残基正好位于蔗糖C-6位上，充当着蔗糖C-6位上 天然保护基团的角色。因此，若以棉籽糖为原料，对其C-6、4\ l\ 6W进行选 择性氣化，再水解a-l，6-糖苷键除去半乳糖残基，即可得到三氣蔗糖，反应 过程如图3-36所示。
一、甜叶菊的甜味成分
天然奇异果素和贲组奇异果素都在味道修饰作用方面表现出了相似的pH依 赖性作用形式（在酸性条件才发生甜味反应），但重组奇异果素的味道修饰作用 与天然奇异果素的相比有所下降。在PH3.0条件下，0.5mg/mL重组奇异果素的 味道修饰作用仅相当于O.lmg/mL天然奇异果素的味道修饰作用。实验数据表 明，重组奇异果素的二聚作用是其发生味道修饰作用的必要条件，这与事实—— 天然奇异果素在果实中以二聚体的形式存在相符。而且奇异果素的味道修饰作用 是通过甜味受体起作用的。另外，结果还表明，重组奇异果素和天然奇异果素的 构象及二级都是相似的。
注广，从氨基洎开始计算。
例如，在三氯蔗糖中，6-0H和6'-C1间所形成的分子内氢键导致呋喃环 的假旋转和分子内糖苷键C, -0-Cr的轻微转动，使位于果糖基单元的6f-Cl 占据了可与受体活性位点相互作用的位罝，从而有助于三氯蔗糖与甜受体的紧密 结合并提髙甜度。
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
仙茅蛋白的异型二聚体（仙茅蛋白丨-2)不仅能产生甜味，而且在水和柠 檬酸存在的情况下还具有味道修饰性能。因此，研究人员推测，C树oiia中的 甜味蛋白实际上是由这种异型二聚体组成的，并把这种异型二聚体命名为仙茅蛋 白 1 -2 或 Neoculin。
