瑞昌市D-木糖
早在100多年以前，人们就知道对位乙氧基苯脲具有甜味，甜度是蔗糖的200 倍。该化合物在美同曾一度允许使用，后由于发现有诱变性及毒性而被禁止俾用。
通过研究不同预培养时间下，CYH抗性细胞和活细胞的增加量来确定最优 预培养时间。随着培养时间增加，活细胞和CYH抗性细胞增加，但CYH抗性细 胞的增加速率比活细胞快，转化体和活细胞数之比在6h内一直增加，但更长的 培养时间对转化体与活细胞数的比例影响不明显（图5-17)，这表明6h内CYH 抗性基因已完全表达了。
五、阿力甜的应用
以泡盛曲霉(AspergiUus awamori)为嗦吗甜基W宿主细胞构逑的表达系统， 采用强力霉菌启动子，对2个基因表达盒进行2次转化，并用KEX蛋白水解酶 水解融合蛋白得到嗦吗甜。转化体在优化培养基摇瓶培养得到的产星可达 14mg/L,发酵鎌培养产量约为100mg/L,具备商业化生产的潜力。
Sarroch Theemsilp等还根据分子组成计算了分子质苗：。奇异果素的氨基酸部 分的分子质量为21257u，糖组分约占13.9%，因此总分子质鱼为24600U (约 25ku)，该值是由SDS - PAGE估测的分子质世28000u的88%。对于奇异果素分 子质量，若采用的测定方法或样品不同，结果也不同。在尚未得到纯样品时，根 据粗样品采用不同方法测得的奇异果素分子质迸均约是25ku的2倍。如用SDS -PAGE测定的未还原奇异果素的分子质谊为43kii，约是根据氨基酸组成及糖类 成分计算的分子质萤25ku的2倍。奇异果素的粗提物用0. 5mol/L NaCl从Sepha- dexG-75柱洗脱后，发现分子质世为52ku处的组分具有变味活性。在无DTT 的SDS-PAGE中，在431oi处有一条宽带，而奇异果素还原后，在28ku处有宽 带。天然奇异呆素用低角度激光散射（low angle laser light scattering)测定的分 子质量为90ku。这些结果表明天然粗奇异果素是25ku-肽的二聚体，纯奇异果 素娃该肽的四聚体，有可能杂质使得奇异果素二聚体难以聚合成为四聚体，并发 现奇异果素的纯四聚体和天然二聚体都有变味活性。
注：①来自 QjCCH (NHj)4—X—* ②来自一X— (COjMc) Ph
比较二种试验操作，后一种操作虽然可省去制冷设备，但其得率较低，也较 难提纯。更重要的是，由于糖苷键在酸性溶液中易断裂，温度越高，断裂越易发 生。综合考虑，采用第一种方法为好，既安全又高效。
Guthrie和Wauers认为，1 ’ -氣-厂-脱氧蔗糖对转化酶是稳定的，而且酸 对它的水解速度为对蔗糖的丨/10。与6’-氣衍生物一样，它比蔗糖甜20倍，但 6-氣-6 -脱氧蔗糖是苦的。易从七-新戊酸酯（hepui-pimlate,游离的 4-OH基闭）制得的4-氣-半乳糖基-蔗糖衍生物，其甜度是蔗糖的5倍（图
由于双酶-化学联合法在氣化衍生方面，与传统的纯化学方法一致，本节仅 对其中S - 6 - a的酶法合成部分做详细研究和探讨。
S-6-a,得率为48%。
