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图2-21分別表示Z-Asp、PheOMe、Z - Asp - PheOMe的尺值,和饱和乙 酸乙酯水溶液pH关系曲线。P和p尺值固定时,试验结果和由式(2-22)?式 (2-24)算得的结果相吻合(曲线表示计算结果)。表2-6列出以乙酸乙酯为 有机溶剂时不同物质的P和pA:值,P值反映了各物质和有机溶剂相互作用的程 度。表2-6还列出用氣仿和二氣乙烷为有机溶剂时测得的P值。二相体系中的 合成速率可通过速率等式(2-19) ~式(2-21)和分配系数计算式(2-22) ~ 式(2-24)求得。
虽然Vilsmeier试剂选择性很好,但由于反应温度和酸度高,控制不当舄炭 化和水解,而且反应过程中所产生的S02、HC1气体腐蚀性较大,需对其进行特 別处理。而使用三苯基膦_0(:14进行氣化,反应条件温和。具体方法是,将 6-PAS溶于吡淀后冷却至(TC,在OtT分别加入三苯基膦和CC14,逐步升温至 70^,恒温反应3h。加人甲醇终止反应,真空浓缩至干后加入丙酮,去除不洛 物后浓缩,最后加乙醚结晶,经过滤、重结晶得到浅黄晶体产物。三苯基膦与 6-PAS的摩尔比分别为7:1、6:1、5:1、4:1,与CC14的摩尔比均为2: 1,结果 如图3-25所示。从曲线趋向看,三苯基膦过量越多,越利于TOSPA生成,但 从经济角度出发,考虑到三苯基膦过貴所增加的生产成本,控制其配比为6:1, 此条件下得率为51.8%。图3-24反位温度和时间 对氣化得韦的影响图3-25三笨基膦与ca4摩尔比 对TOSPA得率的影响
甜味强度的尝味评定方法通常可分为三种:摄的估计(megnitude eslima- tion) % 定级方法(ranking procedures)和网值测定法(threshold determination )。 尽管人们对这三种方法的本质区別在理论上还存在着争议,但它们都能得到一致 的再现性好的结果。
(四)致突变试验
很多世纪以前,非洲西部就种植一种能结鲜红色、金字塔形状果实的植物。 这种果实紧挨皮层以下的组织具有强烈的甜味,它的使用甚至比甘蔗引入非洲西 部还要早。然而,这种果实直到19世纪才在较大范围内被人们所认识。很多植 物学家开始周游这块“黑大陆”,对该植物进行分类与鉴定。Daniell于1839年 首次遇到这种红果子,进行了很多的研究。他在1855年的PhamrnceuUcal Journal (《药学学报》)上报道了他的研究结果,证实这种果实内部肉质有很强的甜味。 后来,BermeU经仔细分析认为它属于木冬叶届(Pkrjnium'}植物,就将之命名 为P. daniellii借以纪念其发现者。BemuiU还用传统的拉丁文字对这种植物做f 详细介绍。但令人遗憾的是,Bernie丨丨鉴定错了,后人重新鉴定确认它属于竹芋 科(Maranlaceae)植物 77Mmmo/ocomw,故重新命名为:T. danieliii (TD)。
(一)甜菊苷的提取与精制用水提取通常选用干甜菊叶为原料采用连续提取法。欧洲一篇专利认为在 90 ~110弋之间对甜叶菊叶子进行预热处理可去除一些不受欢迎的甜味杂质,同 时还指出这过程最好在空气流、惰性气体或水蒸气中进行。还有一种去除甜味杂 质的方法是在25 ~59t的水中或丨0T以下的乙酸乙酯、二皤烷、二氣化烷、四 氢呋喃或1, 2-二氣乙烷类有机溶剂中提取。有人认为往浸出液中添加些正磷 酸盐、氢氧化钡或硫酸钡等,有利于下一道过滤工序的顺利进行。虽然日本 Stevia公司认为在100弋热水中提取也可去除甜味杂质,但他们没有说明如何从 残余的叶子中提取出残留的双萜苷。
阿斯巴甜的酶法合成技术由于化学合成法专一性差,得率较低,故人们又致力于酶合成法的研究,以 期提髙得率并降低生产成本。酶合成法是使用合适的蛋由酶,将L-天冬氨酸 (氨基闭已保护或未保护)与L-苯丙氨酸甲酯缩合在一起。除此之外的操作, 与化学合成法一样。酶法合成的优点和缺点比较明显。酶法合成的优点:①转化率通常达95%以上,比化学法(一般仅70%)高很多;②且酶法只生成《-型产物,没有冷-异构体生成;③可采用外消旋化合物为底物,而在化学合成法中只能采用L型底物。
(CH,),N ? SO, + C6HnNH, 60 ~7°^ >C6HnNHSOjH ? N (CH,〉3 C6HnNHS03H ? N (CHj), +NaOH ~?QH,,NHS03Na + (CH3),N + H20
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