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不同的Candida utilis菌株电脉冲转化的效率有较大不同。将Bgl D酶切后的 PCLRE2通过电穿孔转化至ATCC9256和ATCC9226，都能得到CYH抗性菌落， 多拷贝载体DNA也串联整合至rDNA区，但转化率都不到ATCC9950的10%。 整合至ATCC9256的pCLRE2拷贝数为6~8，整合至ATCC9226的拷贝数为 5-9,整合至ATCC9950的拷贝数为10?12。
通过将SCM基因克隆于带GADPH后动子和终止子的表达载体pGAP，然后 将其转化成S. DC04和DBY746,可生产出重组SCM及其突变体。利用
加拿大健康保护局（CHPB)的一份研究是用雄、雌白鼠各50只，糖精虽 均是5%，幼畜断奶后喂以代饲料，两代动物喂养终身。试验表明第二代动物出 现了生长速度减慢现象（虽然其饲料摄入量并不减少），但繁殖力、寿命和血液 参数等没有变化。虽然在一些动物身上发现了明显的膀胱结石和肾结石，但其发 生率与试验处理没有关系。对照于控制组，5%糖精组的第二代动物上发现了明 显的膀胱肿瘤病变。
1985年，山田等人用含有双糖苷A及甜菊苷的甜菊提取物喂养大鼠22个月 进行慢性毒理试验，结果表明提取物对大鼠的最大无作用量是550mg/kg。另一 个2年的喂养试验表明，甜菊提取物没有慢性毒性和致癌性。R. E. Wingard等人 的活体外试验表明，大鼠肠逬微生物能将甜菊双糖A苷降解成甜菊醉，转化率 大约为65% ,而相同条件下甜菊苷则几乎全部转化成甜菊醇。
近年来，随着计算机模拟技术在微观领域应用的飞速发展，将其应用于甜味 分子构效关系的研究已成为一种必然趋势，这将有助于AH、B、X甜味三角理 论的科学化和精确化，为最终揭示甜味分子的呈味机理开辟一条崭新的途径。尽 符AH、B、X理论目前的主要缺点是缺乏可预见性，然而对甜味分子构效关系 的研究，将有助于提髙对甜味细微差别的认识，并有希望导致可预见性更好的甜 味理论产生。
酸而形成的三肽进行研究（表2-63)。化合物[152]没有甜味，若将它的第 二个Gly替换成D - Ala或将其第三个Gly替换成L - Ala,这样产生的化合物 [153]和[154]却带有一点甜味。对于第二和第三个氨基酸来说，较为理想的 构型分别是D-型和型。经优化后的三肽化合物[丨55]和[156]，其甜度适中。表2-63三肽化合物的结构与甜度注：括号内为SukchilD等人的数据。
甜味分子多点结合模型根据多点结合甜味理论，可以合理构造出各种甜味分子及其衍生物的多点结 合模型。首先确定甜味分子的两个特征结合点，即结合部位D (4-苯腈基）和 结合部位B (C02_或氧原子），然后就可以准确确定甜味分子的其他结合部位。
细胞提取物经离心、溶解后进行分析。酵母的非水溶性组分经SDS凝胶电 泳发现存在分子质量为23000jjl的蛋白质，即嗦吗甜分子，而对照样不产生类嗦 吗甜蛋内质。
4.对甜味分子空间结构要求的设想由于甜味感觉对底物的要求可以是小如CHC13分子，到大如多肽和大分子蛋 白质，因此可以认为，甜味化合物和甜味蛋白受体之间最初的相互作用，发生在 受体表面部分。对于那些与受体之间无疏水接触的甜味剂分子，由于这种表面吸 附之间的作用力相对较低，故其甜度也低，这也许就是糖和糖醉均不是很甜的原 因。对于那些与受体之间有一处或多处疏水键合的甜味剂分子，除了在AH、B 基闭上的两点接触外，更包含有空间上的疏水键合，这种更深层次的键合则很可 能发生在甜味蛋白受体中类似酶活性位点的“嵴”或“裂缝”中。
