上栗县结晶果糖
不同甜味剂之间的增效作用是甜味的一个特殊现象。但是,这一现象长期以 来都无法在分子水平上得到解释。Morini等通过对人体序列的建模研究,首次为 这一现象提供了可能的解释。在利用mGluRl谷氨酸受体的配体结合区域的A (闭合)链和B (打开)链研究甜味受体的人体T1R2和T1R3序列组成的所有 可能的二聚体时,研究人员很快发现两个“A盥部位”都太小以至手不能容纳 最大的非蛋白甜味剂,但是它们可容纳至少四种化合物一t糖精、阿力甜、阿斯
(三)固定化酶的稳定性
最初的甜蜜素是以薄片形状投放市场的,仅供糖尿病患者使用。后来出现了 甜蜜素与糖精的混合产品,不再仅限于糖尿病人食用,但主要还是用于糖尿病人 的食品。不久之后,粉末状和溶液状的甜蜜素产品相继问世,为扩大它的应用范 围提供了条件。后来。软饮料工业开始使用甜蜜素与糖精的混合物,使它的销售 情况大为改观,在美国的消耗童直线上升,成为一种消费摄很大的人工甜味剂。
要在酵母中表达嗦吗甜,首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达,采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因,为便于操纵DNA序列,在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列,随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
蔗糖醚化和脱氧衍生物的甜度变化,也证实了以上推断的正确性。如蔗糖的 4 -脱氣、4 -0 -甲基衍生物均有甜味;而当蔗糖分子C -3'位上的羟基被酯化成 3#-0-乙酯蔗糖时,由干掩盖了生甜团的AH基团,因此生成物不具有甜味。这 些结果均与以上确定的蔗糖甜味三角形基团的结论一致。此外还发现,3-酮基-蔗 糖在甜度h和庶糖相似(保留有蔗糖AH、B双官能实体),而蔗糖C-3位上的差向 立体异构体异鹿糖则完全没有甜味。为此,我们甚至可以预测出3-0-甲基蔗糖成 该是甜的,而2 - 0 -甲基蔗糖衍生物如2 -脱氧蔗糖或2 -酮基-蔗糖必然不甜。
甜菊(Stevioside)是从菊科孽本植物■Sfwia re6au
简单的疏水D-氨基酸和合成二肽(如阿斯巴甜)就可以激活甜味受体。 所有这些分子,如谷氨酸,都有一个相同的氨基酸结构成分——这一结构成分由 羧基及其相邻的氨基组成u Morini等猜测,受体T1R2-T1R3的活性位点应保留 了所有这些必要特征,否则就不能与这一结构成分结合了。换句话说,在由 mGluRl推测T1R2-T1R3的结构时,位于mGluRl空穴壁上的那些结合由竣基 及其相邻的氨基组成的结构成分的极性残基应当高度保留。事实也证明, mGluRl中那些直接和由竣基及其相邻的氨基组成的结构成分发生相互作用的残 基确实完好地保留了下来。相反,研究人员估计,空穴其他部分的残基,即 mGluRl中那些结合谷氨酸侧链的残基,可能在T1R2-T1R3中由极性转为非极 性。Morini等通过对四个模型的研究,发现结合谷氨酸的由羧基及其相邻的氨基 组成的结构成分的残基在所有原体中都完好保留,而mGluRl中联结谷氨酸盐侧 链的残基则变成极性更弱或不带电的残基。
由于T1R2-T1R3受体和mGluRl的序列之间具有足够的相似性,因此可以 由此建立模型。似乎这也就足以猜测甜味受体也有和mGluRl —样的总体特征。 Kunishima等人的研究结果表明,mGluRl的胞外N端区域有三种不同的结晶形 态:一种是与配体复合的形态(lewk.pdb);另外两种则不带配体,分别是自由 态I (lewLpdh)和自由态II (lewv?丨xlb)。自由态I是和复合态显著不同的“非活 性”的构象,自由态n则是与具有“活性”复合态几乎一样的构象,两者处于平衡 状态。如果受体T1R2-T1R3像mGluRl那样变化,那么它也应该存在三种不同的 形态:含小分子质虽甜味剂(与谷氨酸分子相应)的复合态、自由态I——“非活 性”构象和自由态n——具有和“活性”复合态几乎一样的结构。
上栗县结晶果糖
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