郴州市安赛蜜
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
这些结果表明，质子化的Neoculin有呈现展开构象的趋势，而未被质子化的 Neoculin则呈现与结晶结构相似的关闭构象。Neoculin的亚基之间相互作用要弱 于植物凝集素之间的，这意味着，在甘露醉结合植物凝集素中所不存在的这些亚
_法合成的缺点：①它的投料浓度与产物浓度一般都很低，生产张度低，物料处理量大，能 耗大，酶的回收困难；②酶法尚无法独立完成阿斯巴甜合成的全过程，其甲酯化仍需用化学法， 在生产过程需兼具化学法和酶法两套工艺。
日本味之素公司的研究人员采用逐级固相肽合成法进行莫奈林的非生物合 成。首先，分别地合成A链和B链，然后混合A链、B链。当A链和B链以1:1 的比例混合时，会导致大里的不发生反应的A链和B链残留。当A链和B链以 1:1. 9的比例混合时，可获得产量高达25. 7%的合成莫奈林。单独存在的A链或 B链不含甜味，而合成的莫奈林却有显著的、持久的甜味。
通过研究不同预培养时间下，CYH抗性细胞和活细胞的增加量来确定最优 预培养时间。随着培养时间增加，活细胞和CYH抗性细胞增加，但CYH抗性细 胞的增加速率比活细胞快，转化体和活细胞数之比在6h内一直增加，但更长的 培养时间对转化体与活细胞数的比例影响不明显（图5-17)，这表明6h内CYH 抗性基因已完全表达了。
(-)两相体系中Z-Asp-PheOMe的合成反应动力学 要定量分析两相反应，首先需弄淸下列关系：①固定化酶催化反应在水相中进行，因此需了解反应在饱和有机溶剂缓冲 液中的动力学和平衡关系；②底物和产物在水相和有机溶剂中的分配比；③分配比引起的水相pH变化；④水相、有机相之间物质传递产生的影响；⑤酶在界面吸附引起的变化。
成分解。最后用甲辟/氢氧化铵（2:1)通过中和、水解反应终止氣化。
型代表。Suosan的甜度是蔗糖的700倍，带有明图6-28 Su_的化学结构图 显的苦味。这一系列的其他化合物，有的甜度比Suosan要大得多，甜味特性也 较好。例如，Suosan与阿斯巴甜的缩合物，其甜度竞是蔗糖的14000倍。
当带嗦吗甜基因的质粒转移人酵母，在选择性培养基上培养一段时间后， 在相应的培养基中发现了甜味嗦吗甜A、B,且分子质粗均与成熟嗦吗甜的分 子质量相同。嗦吗甜I虽用同样方式生产，但没有出现在培养基中，该结果与 它不能在体外折叠相符。由此可以看出单个氨基酸变化对蛋白质结构影响 很大。
四、甜蜜素的应用
