上饶广丰区结晶果糖
目前尝试的各种提髙G-6-a得率的方法,都未能获得成功。例如,在巨 大芽孢杆菌培养基中添加适萤的乙酸钠,但得率仍和没有添加时一样。又考虑到 巨大芽孢杆菌能产生维生素B,2,而维生素Bl2包含乙酰基并能被添加到培养基中 的Co2 +所刺激,因此推测Co2+也能刺激巨大芽孢杆菌分泌出G-6-a,但在培 养基中加入Co2‘并没有观察到G-6-a的增长。此外,调节培养基的氧浓度、 pH和氮含量等措施,对提髙G-6-a得率也没有什么效果。
在单糖专-?性果糖转移酶的作用下,G -6 - a接受从蔗糖水解中产生的一个 果糖基单元,从而专一地合成S-6-a。反应体系通常含有蔗糖、G-6-a、磷 酸盐-柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)和果糖转移酶。研究发现,当蔗糖与G-6-a 的摩尔比为2:1时,S-6-a的得率最高,而高浓度的G-6-a底物却可有效避 免因水解产生的果糖基转移到水相而造成的合成损失。
(1)甜味纯正,甜度大。
组成蔗糖的两个单元——葡萄糖和果糖,当它们被转化成甲基- a - D -吡 喃葡萄糖讦或海藻糖和甲基-D -吡喃果糖苷时,形成的化合物甜度分别只 有蔗糖的丨/丨0和零,这说明甜味化合物要求生甜团三角形呈-种特殊的排列组 合。处于结晶状态和溶液状态的蔗糖,其a-丨)-吡喃葡萄糖基单元的构象楚椅 式(4C,),而其沒-D-呋喃果糖基单元的构象是船式(3T4);呋喃环在它的右 角处连接于吡喃环平面上,娃通过两个分子内氢键0-6'连接于0-5和厂连 接于0-2而实现的(见图3-38,未加“”’符号和加了 符号的数字分别表 示葡萄糖甚和果糖基单元上的碳原子和被犇近的氣原子)。
(20> (25) ()0>
TGS -6 -a与乙酸酐吡啶溶液充分反应得到TGSPA,此全酯化反应不涉及选 择性保护的问题,因此反应条件相对于蔗糖C-6位的单酯化来说要宽松得多而容 易进行。然后,通过乙酸乙酯或甲苯等有机溶剂将TGSPA从含水的体系中提取出 来,再经浓缩、结晶,最后脱除5个乙酰基,即可得到较纯的三氣蔗糖终产物。
Okahala和Ijirt)将嗜热菌蛋白酶偶合到尼龙胶囊上,胶囊表面经戊二醛处 理接上(氨甲基)-苯乙烯,旗核内缓冲液PH7。在40弋,反应物 Z-Asp6mmol/L, PM)Me300mmOl/L都溶于氣仿,用固定化酶催化进行分批反 应,每次反应2h。该反应特点是其酶催化所需的水都由囊核供给。
由于各甜蛋白间只存在一些三肽序列相同,且它们连接抗体后就丧失了 甜味或变味特性,W此另外一些研究人员猜测一些氨基酸拉伸后参与形成能 被味觉识别器识别的结构。根据报道,仙茅蛋白分別和莫奈林、奇异果素和 嗦吗甜有2个、5个和6个相同的三肽,但免疫印迹分析结果表明,仙茅蛋 白的抗血淸只与奇异果素发生微弱的反应,而与嗦吗甜、莫奈林不发生反 应。假定这些推测的三肽是在分子表面,则它们应存在于5个完全铩露在表 面的环中:11 ~丨4、46~51、66 ~ 70, 76 -78, 106 ~ 109 0这些氨基酸序 列明显与没有甜味和变味特性的GNA不同。特别是,属于11~14、46~51 和66 ~70的氨基酸非常接近(1.50~1.60mn),能够构建一个一般的抗原 决定子(common antigenic determinant),它能使味觉接收器失效。另外,多 肽链折叠后,仙茅蛋白的AsP71和Tyi65靠近并暴寐在表面,并且形成一个 类似于阿斯巴甜的味点。
Lethco和Wallace的研究结果似乎比较中肯,作者的试验结论认为糖精可能 的代谢产物是由于糖精化学结构的轻微破坏产生的,而并非由于酶的作用引起 的。但在试验过程中并不排除试验品略带些杂质的可能,作者也没注意试验过程 中发生水解的可能。