万安县甜菊糖苷
由于莫奈林的A链N端与B链C端非常靠近，因此研究人员利用基因工程 技术生产共价的连接单链莫奈林。单链贷奈林有两种类型：SCM和MNE1。SCM 是通过直接把B链C端的Ghi50连接到A链N端的Argl而得，它由94个氨基 酸残基组成。MNE丨则是通过Gly-Phe 二肽连接B链和A链而得，由96个氨基 酸残基组成。利用这些合成的基因，研究人员已经实现在不同的宿主细胞（大 肠杆菌、酵母等）中表达和生产奠奈林。
为了进一步确定三氣蔗糖AHS、Bs、Xs生甜团的组成，Tetsuo Suami等人利 用计算机模拟技术进行更为细致的研究。首先假设，甜味蛋白受体是一个在 /V-末端及K?附近含有L-天冬氨酸酰胺（AH和B部位）和L-脯氨酸残基的
对天然和变异莫奈林的构型研究表明，莫奈林的三维结构和两条硫醉蛋白酶 抑制剂——Cystatin和Stefin B非常相似，这说明莫奈林除了甜味外还可能有其 他一些生物学功能。
甜味与苦味之间存在着密切的联系，这两种味觉都取决于生味底物分子的总 体立体化学。相对来说，把具有甜味的糖转变成具有苦味的衍生物还是比较容易 的。在吡喃葡萄糖苷结构中，可以发现1、2、6位罝上和环上的氧原子都含有苦 味响应值。这个结果既明显而又令人满意。对这些分子中央，特别是异头碳原子 或更精确地说是那些不包含甜味原子的观察表明，糖分子的尾端具有产生各种味 的功能。这使人们联想到甜味与苦味受体之间存在着空间立体上的联系。
(三）Neoculin与甘露醇结合植物凝集棄的结构比较
单链莫奈林在高温和酸性溶液中能保持稳定。细胞抽提物经高温或酸性溶液 处理后，莫奈林仍在溶液中，而大多数宿主蛋白已发生沉淀。细胞抽提物酸性溶 液PH5.0、4.5或4.0保持12h，或501保持丨Omin，即可提取到可溶组分中的 莫奈林（图5-20)。单链奠奈林在70T或在PH3. 5时与其他蛋白一起沉淀。经
C-2上氧代对甜味具有很显著的影响，例如2，6，6'-四氣甘寐蔗糖 非常苦，苦味儿乎与奎宁差不多。用甲烷磺酰氣和二甲基甲酰胺先在-20尤下对 蔗糖处理2h，再在70T下处理10h,可有选择性地在C-6和C-6'上氣化，产 率在50%左右。在二甲基甲酰胺中，201下，用2，2-二甲氧基丙烷和对甲基 苯磺酸对其进行缩醛化作用，处理4h,然后在嘧啶中川醏酸酐使其乙酰化，除 去环乙缩醛，生成c-r和C-2位未被保护的蔗糖衍生物。用磺酰氣和氣化锂 将其氣化，脱脂后生成苦味的2，6，厂，6、四氣忡露蔗糖。
图4-15所示为甜菊双糖苷（Rebmidioside)的化学结构。1982年田中报道 它（包括双糖D、E苷）的甜味特性比甜菊苷来得好，所带的苦涩味也要少得 多，但守田并不完全同意这个观点。他们两人一致认为甜菊苷带有很强的苦味和 不愉快后味，且甜味来得太慢。与田中不同的是，守田认为双糖A苷不带任何 苦味或不愉快后味，其甜味特性也很像蔗糖。但Schiffman不同意田中和守田关 于甜菊苷和甜菊双糖苷甜味特性的评价，他认为甜菊苷和双糖苷都带有很强的苦 味和金属后味，就像糖精钠一样。一般的观点是双糖苷A在甜味特性上比甜菊 苷更接近于蔗糖，所带的后味也较小。日本Maruzen医药公司认为，同时包含甜 菊苷和双糖A苷的甜菊提取物的味觉特性很像蔗糖，唯一不同的是提取液的甜 味来得较慢，去得也较慢。该公司还特地将含有甜菊双糖苷和50%甜菊苷的甜 菊提取液命名为MarumilOn50，并已商业化生产。日本Tame生化公司也生产一 种类似的产品，商品名为Stevix。MarumilOn50溶液的甜度随着浓度的增大有所 下降，但在5%盐溶液中其甜度明显增大（表4-7)。尚未见到有关甜菊双糖C、 D、E苷甜味特性的报道，但我们暂且假定它们与甜菊双糖A苷相似。
图2-22比较了 401时以乙酸乙酯为有机溶剂的二相体系中（水相和有机 相体积比为丨），合成Z-ASP-PheOMe的实验结果和计算结果，曲线表示计算 结果。由阍可见，在pH5.0时，Z-Asp-PheOMe (ZAPM)的理论值和试验值 很吻合。PH6.0时，反应刚开始二者吻合很好，但后来试验值大于理论值。这个
四、利用全基团保护法生产三氯蔗糖
