亳州市山梨糖醇
奇异果素存在于果浆,不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液(PH10.5)进行提取,这样容易导致变味活 力的下降,而且溶解了多种很难去除的深色物质,无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取,这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定,并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺:冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀,沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙,得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品(表5-18)。
1980年,Sweatman和Renwick用经过系统安排其生活方式的白鼠做试验, 观察糖精摄人后在机体血液、尿和各组织中的分布。他们让白鼠摄入含 0% ~10%糖楮的饲料维持22d,跟踪在24h内血液中糖楮浓度的变化情况及糖 精在各机体组织中的分布情况。研究发现在肺、肝、肾、脾和肾上腺中的浓度较 髙,肠道、肾、泌尿膀胱中的浓度较机体整体平均浓度髙,膀胱与尿中糖精浓度 比值为1:100。据此,作者认为糖精通过尿向膀胱的扩散渗透率有限。这一结论 与他们的早期结论一致,但与Co丨burn所报道的正好相反,因Colburn认为白鼠 膀胱对糖精的吸收率很明显。这一差异的部分原因在于两个试验对动物膀胱的操 作控制情况不同,Kemvick和Sweatman所采纳的方法是用镊子或轻轻触摸膀胱以 排出尿,这样造成尿的表观渗透率增大。
因NSM产品中还包含谷氨酸钠及5 -核苷酸之类鲜味增强剂(作用与嗦吗 甜类似),有人推测嗦吗甜可能对鲜味不起作用。但事实表明嗦吗甜也具有对鲜 味和咸味的增效作用,它与5 -核苷酸一样能够增强谷氨酸钠的鲜味。
表2 -26 HPLC分析得到的纽甜产率1
蔗糖(:-6位羟基的乙酰化保护反应可看作是乙酸酐的醇解反应,吡啶是此 类反应最常用的催化剂。吡啶催化的乙酸酐醇解反应是亲核类型的,其中包含2 个连续的四面体机理。反应速率与蔗糖和乙酸酐二者的浓度呈正比。增加蔗糖的 用量有利于反应向正方向进行,同时也有利于蔗糖单酯化产物的形成。相反,尽 管增加乙酸酐的用最也有利于正向反应的进行,怛过萤的乙酸酐势必造成不受欢 迎的蔗糖多酯化产物处于优势地位。
图3 -34所示为在单糖专--性果糖转移酶合成S -6 - a过程中,底物和产物 浓度的变化。从图中可以看出,在反应初始阶段发酵生成S-6-a的起始速率和 时间成线性关系,随后逐渐失去线性关系,这可能是因为葡萄糖对酶的竞争性抑 制作用和底物浓度降低的缘故。在此期间,少数低聚糖副产物也会通过转果糖基 作用而形成。在反应后期,反应速率和S-6-a的降解速度及剩余蔗糖的浓度和 酶的活力有关。反成过程中,S-6-a的最高浓度可达到12%,得率约为58%, 随后S-6-a会慢慢水解,使果糖浓度逐渐上升。由此可见,5-6-3的得率是 处于动态发展中的,其最大得率依赖于果糖转移酶所引起的各种反应。
(三)化学-酶联合法制备纽甜
奇异果产于热带非洲西部加纳、刚果等地,是山榄科(Sapotaceae)植物 Richardella dulcifica Baehni 所结的果实,这种植物以前常称为 Synsepalum dulcificum DC。该植物属于灌木,生长比较缓慢,种植之后要过3 ~4年才能长到2.0 ~ 4.5m的成熟高度,此时开始在分枝处开花结果。典型果实长2cm,呈鲜红色的 椭岡球状。果皮内侧有一层较薄的果肉,果肉包围着一个橄榄状的大核,奇异果 素就存在于果肉中。
尽管对三氣蔗糖结晶体X -射线的结构分析表明,在2 - OH和3' - OH之间 会形成一个分子内氢键,其中2-OH是质子受体,3'-OH是质子供体。但在一 个稀释的含水溶液中,分子内部的氢键很可能分裂,断裂开的部分可分别与螺旋 形甜味蛋白质受体中末端氨基酸残基上髙度缺电子的NH/ (AHr,下标i■是 指甜味蛋白受体,下同)和富电子的CONH2 (Br)形成外部氢键。因此,3'- OH/2 -0具备成为三氣蔗糖AH/B对组成的客观条件。
又有人提出了甜味分子的多点结合理论(如multipoint attachment theory, MPA)来解释蔗糖衍生物的甜味机理。根据这个理论,卩-蔗糖属于!},、B2、 AH,、AH2、XH,、XH2、G,、E_、G2' E2、G3、E3、G4、E4 类甜味剂。而蔗糖 的三氣或四氣衍生物,如4,r, 6f-三氣蔗糖(650x)和4,r, 4',6'-四 溴半乳糖基蔗糖(7500 x>,则属于 B、AH,、AH2、XH2、G,、E,、G2、E2、 G3、E3、G4、E4类甜味剂。正是由于甜味分子与受体在B (C-4)部位作用增 强,且 G,、G4 (C-6,、C-l')或 G,、G2、C4 (C-6\ C-4\ C - T)的空 间构象更适合受体蛋白,因此这两种蔗糖衍生物的甜度比蔗糖强。
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