甘谷县甜菊糖苷
有人曾试图通过巨大芽孢杆菌(B. megaterium) NCIB 8508直接发酵蔗糖, 来生产S -6-a,但蔗糖转化酶的活力却导致了主产物是G - 6 - a而不是S - 6 -
两种方法均表明,在29位天冬氨酸的突变(以丙氨酸、赖氨酸或天冬酰氨 替代29位的天冬氨酸)都会生成甜度显著比Bimzein强的分子,而在30或33 位的突变(以天冬氨酸代替30位的赖氨酸或以丙氨酸代替33位的精氨酸)则 会使分子的甜味丧失。在办折叠K域也有相同的情形,当以赖氨酸代替41位的 谷氨酸时,分子甜度最髙,而当以丙氧酸代替43位的精氨酸时,也会导致甜味 丧失。这些结果表明,电荷对产生甜味有重要作用,相对来说,侧链的长度则不 那么f:要。同时,还发现N端和C端的结构对Brazzein的甜度也有很大影响。另 外一个重大发现是,人体和猴试验的结果之间存在者密切的联系。这就给假设 ——猴子S纤维的记录结果可用来估算在人体中同种甜味剂可呈现的甜度,提供 了有力的证明。
第五章高效甜蛋白
通常是将大结晶颗粒的三氣蔗糖粉碎成细颗粒的白色粉末状产品,它的甜度大 约是5%蔗糖液的600倍,甜味纯正,甜味特性十分类似蔗糖,没有仟何苦后味。
莫奈林娃从D. cumminsii的浆果果肉中提取出的甜味蛋白一般用水法抽提, 抽提液经离心分离、超滤浓缩后用离子交换色谱法提纯楮制,再经超滤脱盐后冷 冻干燥。起初,1kg浆果只能获得100?150mg的莫奈林,现在的提取得率已提 髙至3~5g。大批量处理时,可使用分批吸附法。先将水抽提液与分散在 0.02nu,l/L醋酸铵缓冲液(PH5.0)的吸附剂CM - Sephadex C25淤浆混合,接 着用水反复冲洗淤浆达到纯化的目的,然后用0.02mol/L NaCl溶液将吸附在 Sephadex上的莫奈林洗脱下来,超滤浓缩后冷冻干燥。这样分离得到的莫奈林, 若在离子交換色谱柱上分别用NaCl浓度呈梯度上升的PH7. 6和PH8. 2缓冲液进 行洗脱,还可进一步分级成5种纯组分,依次称为莫奈林I ~V,其中最主要的 是莫奈林IV。
虽然人们所进行的大萤研究,包括长达2年的慢性毒理研究均未发现甜菊苷 有任何致突变的可能,但有人发现具有代谢活性的甜菊醇是会产生突变效果的。 1985年Pezzuto等人使用经Aroclor 1254或苯巴比妥及辅酶II处理的小鼠均匀肝 脏组织中的S- 9部位作为活性系统,使用Salmonelia typhimuriurnlWHl携带 “R-因子”质粒PKM1001作为标志系统进行诱变分析。他们总结认为细胞色素 P -450传递的代谢活性与甜菊醉C - 16和C -丨7之间的一个双键有关,它能产 生至今仍未被人们所认识的诱变因子。还认为甜菊醇第13位羟基团是诱变的表 现式,因为异贝壳杉烯酸无诱变活性,且甜菊醇在丨3羟基的乙酰化产物会阻止 其诱变活性。他们还发现有代谢活性的甜菊醇在能观察到有诱变活性的浓度范围 内是很有杀菌活力的。
为了研究正电荷之间强烈的排斥作用是否会改变Neoculin的结构,以及酸性 条件下引起强烈甜味与Neoculin的结构之间是否存在相互关系,研究人员企图通 过研究低pH下的Neoculin结晶结构来寻求答案。可是,他们至今仍未获得酸性 条件下的Neoculin结晶。因此,他们改用通过建立分子动力学模拟来进行研究。
1.体外致突变试验