宁明县阿力甜
果素。首先，导入重组奇异果素基因，构建重组奇异果素的表达质粒，并在表达 质粒中插人KEX2切割位点；然后，将表达质粒导人如orrzoe，获得30 个产重组奇异果素的转化株。选择产量最高的菌株进行大规模培养，培养时间为 3d。Western印迹分析确定了培养基表面有重组奇异果岽的存在。结果还显示， 在非还原条件下，60ku处有一条宽带，301O1处仅有一条校糊的带；而在还原条 件下，60ku处的带消失，30ku处的带却变宽。这些结果与两个30ku单体在非还 原条件下形成60ku的二聚体的事实相符。重组奇异果素的产量估计为2mg/L培 养基，纯化重组奇异果素的产S娃0.8mg/L培养基，所得的单体重组奇异果素 和二聚体重组奇异果素的分子要比天然奇异果素的大。对N42、186Q突变体的 N端糖基化位点的分析结果清楚地表明，这是由于所得糖蛋白的糖链部分质里有 所不同而造成的。
糖苷（以前称“糖甙”），是糖分子半缩醛羟基与醇化合物发生反应失去一 个水分子，生成的具有缩醛结构的衍生物，它具有原来糖分子的环形结构，但在 特殊情况下也可生成具有开链结构的缩醛。糖苷分子中的非糖部分称为配基 (aglycone),配基的原化合物称为配糖体。W配基的不同，有烷基糖苷、芳番基 糖苷、双萜糖苷及三萜糖苷等。根据糖分子的不同，又有葡萄糖苷、鼠李糖苷 等。广泛存在于各种动植物体内的天然糖苷种类繁多，一般都具有复杂的配基。 植物的叶、皮和种子中存在数玲众多的糖苷，它们对植物的生长有重要的作用。
酵母分泌嗦吗甜，是生产嗦吗甜另一种方法。植物嗦吗甜也由分泌产生，因 此可以模拟植物嗦吗甜的产生过程进行酵母嗦吗甜生产。而且植物和酵母的胞内 环境及输出蛋白折香、形成二硫键的细胞机制相似，因此可以推断分泌的嗦吗甜 也将具有甜味构型。将嗦吗甜丨、A、B的基因分别接在一密码序列的1末端， 该密码序列引导嗦吗甜进人细胞膜分泌途径，并最后分泌到培养基。
据分析，它的分子中的於-折奋与月-弯曲的数虽较多，分别为29%和 27%,其余均为自由挠曲。然而，这些仅是理论推测的结果，并非是直接测定的 精确数值。德国柏林的Max Planck学院的研究人员用计算机计算结果表明，嗦 吗甜分子中a -螺旋占10% ,芦-折蚕和/3 -弯曲的占70%，自由挠曲占20%。 显然这些数值与上面的推测相差甚大。
上述类似物在水溶液中的构象也是只有L-型 和延展塑两种。除图2-92 (1)外，其他三种的所有构象中以L-型最为稳定。 最有意思的是，从上述四种类似物的L-型构象可以发现一个明显的规律：图
①甜菊苷的甜度约为蔗糖的200倍；
①蔗糖的三苯甲基化（屏蔽6、厂及6'位上3个伯位羟基团）和5个仲位羟 基乙酰化成乙酰基。
基间二硫键是Neoculin异型二聚体相互连接的歌要条件。这样的结构特征使 Neoculin的结构有更大的可变性，并有助于Neoculin在实现构象剧烈变化的同时 保持其二聚体结构。综合观察结果——Neoculin溶解于纯水（pH 7.0)也能产生 轻微的甜味，研究人员推测，Neoculin的结构是处于开和合的动力平衡状态中 的，中性环境和酸性环境均会破坏Neoculin的这种平衡状态，使结构分别转向闭 合和打开的状态。但只有当分子处于打开状态，才可产生强烈的甜味作用。研究 人员还构建了 Neoculin与甜味受体——T1R2-T1R3的对接模型，并根据研究结 果猜测酸的介入会打破Neoculin的平衡状态而转向开的状态，从而发生配体-受 体相互作用。
