临沭县甜菊糖苷
(5)限制件酶切位点缩写分别为：H, Hind丨；B. Bamll I ； S, Sal I ; X, Xba I ; N, Nco |。
(一）不同卤素取代基对甜度的影响卤素取代基大小及其电负性大小，对蔗糖衍生物甜度具有明显影响。4, r, 6,-三溴蔗糖衍生物的甜度是蔗糖的800倍，而4，\\ 4\ 6-四溴蔗糖衍生物 的甜度为蔗糖的7500倍，显然溴取代基的尺寸能使甜味分子更好地结合到味莆 受体上。电负性较强的氟取代基和尺寸较大的碘取代基都不能如此大幅度地增强 甜味，如4, 6,-三氟蔗糖衍生物的甜度大约是蔗糖的40倍，而4, r, 6'-三碘蔗糖衍生物大约比食糖甜120倍，而相应的氣代蔗糖衍生物和溴代蔗栅 衍生物的甜度分别为蔗糖的600倍和800倍，说明溴代蔗糖衍生物和氣代蔗糖衍 生物具有最合适的分子大小和电负性。
如上所述，在纽甜和阿斯巴甜的主要代谢产物和分解产物中，只有甲醉是两 者共有的。对于纽甜来说，以纽甜增甜的食品或饮料中可转化产生的甲醉的萤要 比阿斯巴甜更低（约为阿斯巴甜的丨/40)。若以纽甜水合物在代谢或分解过程中 最多可能产生的8. 08%计算，那么加入17mg/L纽甜的饮料中甲醇的含量相当于 1.37mg/L0这个最是微乎其微的，因为它约为1L橙汁中的甲醇平均含量的 1/46，为1L番茄汁中的甲醇平均含萤的1/220,参见图2-32。
由于Bntzzdn独特的科研和产业应用价值，大蛩生产高纯度的Brazzein成为 产业界的目标。Brazzein在天然植物中含量甚微，提取困难，产最受到限制。因 此利用基因工程，在其他宿主中表达该外源基因是快速冇效的途径。美国Nektar Worldwide公司已将Brazzein表达至玉米中，It转基因玉米中能提取1kg Brazzein。 另也曾尝试在酵母中表达合成Brazzein，但没有成功。这里讨论用大肠杆菌表达 Brazzein 基因。
在嗦吗甜I、A、B基因的y端，加上3-磷酸甘油活化酶（PGK)启动子， 在3'端加上PGK终止子作为转录终点和多聚腺苻酸信号。将嗦吗甜基因试剂盒， 克隆至及co/i-酵母间的运送载体，质粒pJDB209。由于嗦吗甜基因在￡：.?>/〖和 酵母中都能复制，因此既能在中对基闽进行操纵，又能在酵母中对基闪进 行功能测试。但质粒PJDB209含有一个leu2 - d标记，使办-异丙基苹果酸酯脱 氢酶在酵母中的表达水平较低^将带嗦吗甜基因的质粒转移至突变株中， 这样由于约每200个酵母细胞完成一个突变，因此嗦吗甜基因试剂盒利用 率也提髙了约200倍，基因表达水平也相应提高。
阁5 - 28分子动力学模拟生成的两种不同质子化条件下Neoculin的典型结构
所示。其中，NH/ (B)、COCK (AH)和 0 (XH)以离子键或氢键与甜味受体结合；H (E,)、H (E2)、H (Y)及D区域（被认为能 增强二肽化合物的甜味特性）与甜味受体以氢 键结合；而苯环（G)则以范德华力与甜味受体 结合。
表5-丨0所示为莫奈林（M?nellin) 1~V的氨基酸组成。引人注意的是，莫 奈林分子中不含组氨酸、胱氨酸及游离-SH基团，只含有一个半胱氨酸。氨基 酸顺序分析表明，莫奈林并不是一条单一的多肽链，而是由两条不同的肽链 (A、B链）通过非共价键紧密结合在一起。以莫奈林IV为例，A链由44个氨基 酸组成，B链由50个氨基酸组成，如表5-10和表5-11所示。表5-12比较 了 A、B肽链氨基酸组成的部分差异性。
第三章蔥精衍生物
表2-29 各种食品、饮料中的苯丙氨黢含量
