顺昌县甜蜜素
点。以上两种三氣蔗糖衍生物分子结构处于这种构象时，能量最低，分子C -6羟基为反式非对称（gauche-trans)，并且己酮糖环上的一级氣取代基为 非对称-非对称（gauche-gauche)构象。如果甜味分子的构象不是局限在 少=75°和屮= 95°,那么得到的两种三氣蔗糖衍生物扭曲角均为少=82. 5。， 少=13.8°。研究表明，果聚糖苷衍生物均比塔格糖苷衍生物稳定，其中扭 曲角为少=82. 5°和屮= 13. 8°的果聚糖苷衍生物稍微比扭曲角处于少=75° 和少= 95°的果聚糖苷衍生物稳定，C-6羟基为反式非对称，氣取代基都为 非对称-非对称构象。
热水似乎焙用于提取的较好介质，特别是味觉特性较好的甜菊双糖苷A在 热水中的溶解度要比甜菊莳大。然而，也有几篇专利描述了溶剂提取法的优越 性，这些溶剂包括乙醇、中醇、氣仿、甘油、山梨糖醇或丙二醇等。有时也用氢 化水解淀粉液作为提取溶剂。
(二）酶反应过程的动力学模型该合成反应中，甜菊苷与蔗糖经FFase催化生成FSte和葡萄糖。该反应双底 物、双产物，并且同时有副反应发生，反应机制相当复杂。Chamber!等认为，蔗 糖和呋喃果聚糖的转果糖基反应，符合乒乓（BiBi)机制。Suzuki等认为，S和蔗 糖的转果糖基反应也符合相同的机制（图4-21)，并对该反应建立了动力学模型。 该反应中，游离爾E和蔗糖Sue反应形成第一个复合物E ? Sue。然后G从E ? Sue 释放形成第2个复合物E ? Fru，该复合物与S反应形成第3个复合物E ? FSte，随 后FSte释放。在该系统除转果糖基作用外，还同时进行蔗糖水解和FSte水解反应。 这些水解反应若把水看作第二底物，则也符合乒乓（BiBi)机制，如图4-21 (2) 和（3)所示。根据研究认为FSte的合成不仅受到G的抑制，还受到F的抑制， 因此必须考虑G和F的竞争性抑制作用，并认为酶和副产物的复合物E ? Glu和 E* Fru呈惰性。FSte合成的总反应的理论机制如图4-22所示，A,?屺分别表示一 级反应的速率常数。图4-21各反应的乒乓（BiBi)机制示意图 (1) FSte合成反应 <2>蔗糖水解反哚 (3) FSte水解反应
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
图3-6 2CTC时三氣蔗糖水济液 (0. 1% )在不同pH环境中的稳定性图3-7 751时三氣鹿糖水溶液（(X丨％) 在不同pH环境中的稳定性
目前实现阿斯巴甜化学合成的具体途径有很多种，根据所用天冬氨酸衍生物 的种类，大致有以下3种。
验的具体情况不明，所用的提取物样品也没得到很好的精制。
TGS -6 -a与乙酸酐吡啶溶液充分反应得到TGSPA，此全酯化反应不涉及选 择性保护的问题，因此反应条件相对于蔗糖C-6位的单酯化来说要宽松得多而容 易进行。然后，通过乙酸乙酯或甲苯等有机溶剂将TGSPA从含水的体系中提取出 来，再经浓缩、结晶，最后脱除5个乙酰基，即可得到较纯的三氣蔗糖终产物。
甜菊(Stevioside)是从菊科孽本植物■Sfwia re6au
