隆阳区索马甜
第一节甜菊苷
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Sun等尝试了在转基因马铃磐中生产重组马槟榔。研究人员把全长马槟榔基 因克隆于带马铃薯块茎特异性patatin启动子和来&胭脂碱合成酶基因的终止序 列(NOS. sub. ter)或带CaMV 35S启动子和NOS. sub. tei■的栽体,并把基因和栽 体转染至马铃薯。他们用Southern印迹法分析了转基因植物并通过Northern印迹 法证实了马槟榔n被成功转录。
小鼠经除诞后接种S. mulans和viscousus,饲喂分別含56%廉糖或 93mg/100g三氣蔗糖的饲料。结果发现两组动物群的齿冠损伤数没有明显差异, 但三氣蔗糖组动物在喂养35d后其齿冠损伤的严敢程度明敁较蔗糖组的轻。
美国FDA进行的研究包括三代繁殖研究和二代长期喂养研究。从F,代小动 物中随机挑选出雄、雌白鼠各48只为试验组,分别喂以0%、0. 01%、0. 1%、 1%、5%或7. 5%的糖精一段时间。试验表明,糖精对动物的血液、体1:或成活 率等没有影响,喂以5%或7. 5%糖精的白鼠体重比控制组的低。最明显的病变 是7. 5%组F,代雄鼠泌尿膀胱的肿瘤病变率明显上升,在F,代雌鼠中发现了两种 明显的肿瘤病变现象,在F,代5.0%组和F,控制组均发现一种肿瘤病变现象。作 者指出,还有一些互不相关的病理研究证实了这个结论。
目前,研究人员已完成了对马槟榔n的初级晶体学分析,而对马槟榔n结构 测定工作仍在进行当中。研究表明,马槟榔n由两条多肽链(a链和b链)非 共价紧密地连接在一起,各链氨基酸数目分别是33、72,甜度是等质量蔗糖的 100倍。A链的大多数氨基酸为疏水性氨基酸,B链中也含有很多疏水氨基酸。 两条链中Glu和/或Gin和Arg数量较多,且两条链均不含Ser、Thr、Tyr、Met 和Lys。马槟榔II含有8个半胱氨酸,但没有发现游离巯基,因此马槟榔II虽分 子相对较小,但可能形成了4个二硫键,其高度的热稳定性可能归因于此。比较 发现马槟榔II和嗦吗甜I、莫奈林、Curculin和奇异果素的氨基酸序列没有明显 的相似性,但它和arabidopsis thaliama 2S种子储藏蛋白,尤其是2S A蛋白AT2S 间的序列有很髙的相似性,而后者没有甜味。2S白蛋白AT2S3和A链4 ~20位 氨基酸中70. 6%匹配,和B链7 ~69位氨基酸有52.4%匹配,并且这两种蛋白 的8个半腕氣酸的位置相同。不同植物如/4. fAa/iana、Brassica napus s Ricinus communis和Bert— excelsa的2S白蛋白的序列髙度相似,因此可以认为马槟 榔II是具有甜味的2S白蛋白。的2S白蛋白的小亚基(A链)的某 些序列和嗦吗甜相似,但2S白蛋白的这部分序列与马槟榔n没有相似性。
这些实验结果还可探讨莫奈林的甜味活性区域。重组SCM可像天然莫奈林那样 产生甜味反应。研究人员已通过生产规模装置,利用酵母菌株AB110对SCM进 行了大规模的生产和纯化。SCM基因是被克隆于携GAPDH或ADH2启动子的 pUC栽体的。把带有ADH2启动子的菌株S于450L中试规模的发酵罐进行发酵, 最终可获得54g具有甜味的纯化重组SCM。
1979年,Lee等人用50%甜菊苷喂养小白鼠56d未发现任何异常现象。 Tabarelli和Chagas连续7周喂小白鼠水溶性提取物,没发现有何不利影响。
(一)糖精的代谢