钟山县阿斯巴甜
1%5年，美国Searle有限公司的Schlatter偶然发现了一种带甜味的二肽化合 物——阿斯巴甜。从此开始，以阿斯巴甜为原型，人们研究了 1000多种与之相 关的二肽及二肽同型物，以期获得一种更为理想的高效甜味剂。本节对这个十分 活跃的研究领域的进展与动态做一详细的论述。
纽甜或其单水合物是一种尤臭白色晶体，在U型构象中其分子的2个疏水 基闭处于晶体上方，如图2-37所示。纽甜水合物晶体的熔点为80. 9-83. 4弋， 在200T：以下不分解。图2-37晶体参数为：①经验分子式：? H20，在这一结构模型中不包括水分子结 晶体。②温度：（20±2)1。③结晶体系：单斜晶系。④空间基团：P2, -C22, a = 1.27623 ( 2) nm, b =0.56017 (1) nm，c =1.52934 (3) nm, ^ = 102.403 (1), V = 1.06783 (3) nm\ Z = 2, = 1. 233g/cm3 , fia ( CuKa) =0.75m/m。
目前已有多种含巯基试剂如氧化型谷胱甘肽和胱氨酸用于蛋白质折黉复性， 其中采用胱氨酸比用氧化型谷胱甘肽成本低。将含巯基化合物胱氨酸合成蛋白 质-巯基半胱胺化合物阻隔游离的蛋白质巯基，这样可以有两个好处：变性蛋A 的水溶性敁著提高；只有加人弱还原剂后巯基才能进行相互交换。用还原型胱胺 化合物从变性蛋白质生产天然嗦吗甜的折叠过程如图5-5所示，最终得率提高 至约5pg/mL (25%),可以用品尝试验测定。酵母嗦吗甜A、B折垒复性的得率 较低，酵母嗦吗甜I不能折奋成天然（甜味）构型。酵母嗦吗甜的N端氨基酸 (一内氨酸）虽被乙酰基阻隔，但经-?系列试验证明这种修饰对蛋白质折替及甜味 没有影响。这些结果表明：嗦吗甜丨和A的另一个不同的氨基酸即第113位的 氨基酸可能不是天冬酰胺而是天（门）冬氨酸。
4.对甜味分子空间结构要求的设想由于甜味感觉对底物的要求可以是小如CHC13分子，到大如多肽和大分子蛋 白质，因此可以认为，甜味化合物和甜味蛋白受体之间最初的相互作用，发生在 受体表面部分。对于那些与受体之间无疏水接触的甜味剂分子，由于这种表面吸 附之间的作用力相对较低，故其甜度也低，这也许就是糖和糖醉均不是很甜的原 因。对于那些与受体之间有一处或多处疏水键合的甜味剂分子，除了在AH、B 基闭上的两点接触外，更包含有空间上的疏水键合，这种更深层次的键合则很可 能发生在甜味蛋白受体中类似酶活性位点的“嵴”或“裂缝”中。
关于二氢丧耳酮的甜度，人们早有报迫，（;imdagni等人的研究结果见表 4-18，在或靠近阈值浓度时，新橙皮苷二氢查耳酮（D)的甜度是蔗糖的1800 倍。随着浓度的增加，D相对于蔗糖的甜度下降，当蔗糖浓度为5%时，丨丨的甜 度大约只有蔗糖的250倍。柚苷二氢查珲酮（I)和HDG (111)也同样有类似 的甜度下降趋势，但HDG下降得要慢一些。二氢查]]：酮甜度与浓度关系可用近 似式S = A：C°來表示，其中S为蔗糖浓度，C为与蔗糖甜度相等时的二氢查耳酮 浓度，A：和o为常数3当1、II和EI的尺分别为532、1703和456时，o值分別 为 0.639、0.644 和 0.734。
髙甜度的肽类化合管甜受体可以再接受一个连接于L-天冬氨酰上新增加的氨基酸，但在立体空间 上仍有所限制。因此，三肽化合物不如母体二肽化合物甜。通过天冬氨酰基芦- 竣基团扩展的三肽[151],同样没有甜味。
七、利用泡盛曲霉基因工程法生产嗦吗甜
有关蛋白质结构及其氨基酸组成等知识对了解嗦吗甜的物化性质、口感特
