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关于阿斯巴甜中的天冬氨酸,上述领域的研究表明,经口摄取大剂摄的阿斯 巴甜溶液(34mg/kg),在禁食状态下的血浆天冬衩酸的浓度却没有变化,长期 食用[75mg/ (kg-d), 24周]也不会改变禁食状态下血浆的天冬氨酸浓度, 这可能是由于天冬氨酸在肠道上皮中的髙代谢率所致。因为天冬氨酸与其他氨基 酸的不同之处在于,它是经肠道上皮细胞所代谢,而不是通过肠门脉系统所吸
pH (2) PhcOMe/mmol/L围2-25 在饱和乙酸乙酯中,用固定在Amberfi丨eXAD-7的嗜热菌蛋穴鵑 催化合成Z - A?p - PheOMe的结果(1)一,平衡得率(Z - Aap = 80mmol/L, PheOMe =200mmol/L, a = IS);—?—,初衫反应速车(Z - A?p = PheOMe =80ma>ol/L,a = 15):——,阋定化嗜热*蛋白醻的穗定性.用闭定化酶在40t乙酸乙曲饱和溶液中浸浼一;I)启残留相对法 力表示C
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列,构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列,使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间,给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件,然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上,用农杆菌LBA4404转化烟草,获得卡那痗素抗性转 基因植株,经过PCR及southern分析,证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因,证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下,spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白,经SDS-PAGE分析,初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
Ariyoshi等人提出-种不需保护天冬氨酸氨基团而直接合成阿斯巴甜的方 法。他们将L-天冬氨酸酐盐酸化物与4nu)l L-苯丙氨酸甲酯在氣乙烯之类有 机溶剂中发生缩合反应生成《-和芦-型Asp-PheOMe混合物。如前所述,这 种不带保护基的合成反应一般会出现很多副反应。但Ariyoshi等人通过优化反 应条件来克服这种闲难,成功地实现了无保护基合成反应,反应产宇达到 37%左右。这个研究还表明,通过溶解于稀盐酸溶液,是很容易将a-Asp- PheOMe从泠-异构体及其他副产物中分离出,且a - Asp - PheOMe ? HC1易于 结晶析出。
应,然后加入适话的亚硫酸氢钠溶液,料液转稀后,再加入热水溶解,静置后分 离、过滤,分取油层得邻氨基苯甲酸甲酯(简称甲酯)。先将由水、硫酸与盐酸 配制好的混酸置于重氮锅内,冷却后开始缓加甲酯和亚硝酸钠溶液的混合液,觅 氮温度保持在25T以下,反应终点时淀粉碘化钾溶液显淡紫色,产物为邻硫酸 (盐酸)觅氮苯甲酸甲酯溶液(简称重氮液)。
A、B两种分子的结构总特征很相似。新橙皮苷二氢查耳酮分子整体呈“J” 字母形状,办-新橙皮糖基位于“r字母的弯曲部位,橙皮素二氢查耳酮的糖 苷配基位于“厂字母的直线部位。一些早期的研究认为二氢查耳酮的“活性” 构象(如带有甜味的)是:糖苷配基呈弯曲或扭曲状,两个芳族环的平面大约 呈90°。假如上述固体状态的构象分析结果可引申至液体状态下的分子构象,那 就说明这些早期的分析结果不对。
在蔗糖的化学改性以寻求新的甜味衍生物过程中,4,1#,6'-三氣-4, \\ 6、三脱氧半乳蔗糖(4, r, a^tn-chloro-galactosucrose, TGS,简称“三氣廉 糖”)是其中已产业化的一种甜度最大、味觉特性最好的衍生物,英国Tate &? Lyle公司的商品名为Sucrabse (又称“蔗糖素”>。由于其品质优乘,安全可靠, 美国FDA于1998年3月21日批准使用,同时还得到全世界如加拿大、澳大利 亚、俄罗斯和中国等很多国家的批准。
表2 -38 有关阿力甜的主要安全毒理学试验mean chronic intake estimate, MCIE)为 0. 34mg/kg,这品然不存在任何问题, 所有研究测得的无毒剂量水平(no-effect level,NOEL)均恒定大于丨OOmg/kg, 比MCIE大300倍以上。
图2 -82 阿斯巴甜分子中天冬氨酰残基与苯丙氨酸残基的参趋构象示意图2-83 阿斯巴甜匕口丨和?…丨构象的分子模型 AH-B-X的最佳距离(0.1nm)
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