涡阳县麦芽糖
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本研究采用酯交换反应，以醇钠作为催化剂。具体操作方法是，用lOOmL 甲醇溶解15gT0SPA，加入自制的甲醉钠至PH9为止，搅拌室温下反应3~6h。 与处理过的强酸型阳离子树脂一起搅拌以中和 溶液，30min后过滤除去树脂，用少量甲醉冲 洗。合并滤液和洗液，加人活性炭搅拌20min，
表5 -3 甜蛋白嗦吗甜丨和嗦吗甜n的氨基酸组成
(二）阿力甜的安全毒理学分析已在多种生物体（包括人体）身上进行过阿力甜的毒理试验，结果均表明阿 力甜作为食品甜味剂是安全无毒的。表2 -38所示为部分主要的毒理试验项目。
乙烯乙二醉（乙烷-1, 2-二醉）具有甜味而乙醇没有甜味，因此，醇基 团被认为是维持甜味分子的最低要求。对于碳水化合物來说，相邻碳原子上的一 对羟基（即一个乙二醇基团）被确认是AH、B单元，其中一个羟基作为AH, 而另一个羟基上的氧原子作为B (图丨-4)。甜受体结合位是以氢键与甜分子相 结合的，因为它含有与AH、B系统相反的结构基团，如酰胺（N—H)和羰基 (C=0)结构以及羟基氨基酸等。Suami认为，L -丝氨酸和L -苏氨酸单元均 可作为甜受体蛋白a-螺旋的端残基来充填该甜受体，在此NH2基作为AH， 0H上的氧原子作为B (图1-4)。需要指出的是，在碳水化合物结构中所有乙 二醉单元的任一羟基均可作AH或B单元（假如它们可互换的话），但并不是所 有的甜味化合物（包括氨基酸）都是这样的，这就解释了为何D-型和L-型氨 基酸的甜度不同，而D-糖和L-糖的甜度相同这一事实。
注：在低ffl (25*0和f燥（相对*度50%>条件下，将上述R料混合8-IOrain即可。食用时，将 12g的混合料溶解于一杯热水中，再与-?杯冷水混合，倒人甜食杯中直至凝固即可。在預混合粉配料中. 菜要的话,还可加人灰芽糊W、结晶采糖或葡*糖等。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
(一）安赛蜜的物化性质
它性质稳定，即使在沸腾的醎溶液或稀释的热 硫酸溶液中也不分解。它对肠道微生物的抵抗 能力也很强，大约只有0.1%会被水解成甜菊 醇，而同等条件下甜菊苷很易被水解，其苦后 味也比甜菊苷弱多了。
