铜官区D-木糖
等，属于食品的天然成分。
(一）嗦吗甜基因的合成
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
糖精的一个最大缺陷就是其水溶液带有明显的苦后味与金属味，致使许多人 对之望而生畏。这可通过添加些其他物质来掩盖，较早使用的是甘素（dulcin), 现在使用的是葡萄糖、阿斯巴甜等。1%9年美国禁用甜蜜素之前，糖精大多与 甜蜜素混合使用，广泛应用于食品、饮料工业。该混合物至今仍在澳大利亚及欧 洲一些国家中继续应用。甜蜜素弓糖精的混合物甜味质萤很好，应用于软饮料时 简直与使用蔗糖无异。后来美国禁用甜蜜素，因此人们使用其他物质替代之，这 些物质包括：阿斯巴甜、安赛密、三氣蔗糖、结晶果糖、乳糖和多元糖醇等。在 西班牙，有一种甜度3倍于蔗糖的UNEA产品（UNEA是西班牙Wasserman Uboralories的注册产品），是由糖精、果糖和甘銪糖醇混合而成的，据说风味很 好，被当作糖来销售。
阁5-23野生型Brazzdn的带状图
(7)贫肽酶（Aminopeptidase) 也曾用来合成阿斯巴甜。
SDS - PAGE和Western印迹分析。结果表明，重组奇异果素通过SDS - PAGE处理 后具有和植物奇异果素?样的迁移率，并且它也和植物奇异果素一样地被糖甚化 了。转基因莴苣中的奇异果素含谊为33.7~43.4叫5/8鲜重。重组奇异果素具有和 植物奇异果素相似的强甜味诱导作用。但是，与多数转基闪植物的情况一样，这种 转基因窝苣在后代的表达水平并不稳定，宽组奇异果素的产量要明显降低。
在一定程度上，在狗身上进行的试验结果比较简单。已知至少有某些猴 子具有转变甜蜜素成环己胺的能力。Seiber等人对此进行了很长时间的研
