泾源县甜蜜素
该反应中，糖苷酶催化转糖基反应的得率，主要由糖葙受体、供体、酶浓 度和反应时间决定。表4-U和图4-19分别表示细杆菌H-1的分-FFase催 化甜菊双糖A苷转糖苷作用时，RA浓度和反应时间对其转化结果的影响。受 体甜菊双糖A苷浓度较低时，RA-F转化得率较商；甜菊双糖A苷浓度较大 时，RA-F产量下降。RA-F最大产量在反应开始不久得到，延长反应时间, 由于RA-F发生酶水解使得率下降。在RA0.025mOl/L，反应lh达到最大转 化率82%;当RA浓度0.5mol/L,反应21h,转化率为19%。
安赛蜜在鼠、狗、猪和人体内完全不被代谢，对人体不提供热萤，服入后， 约1.5h，80%?100%被肠吸收，同时在24h内，99%以上从尿中排出体外，反 复试验证明在体内无蓄积作用。
0.1 -0. 4mol/L NaH2P04 (或 MES 或 Bis Tris propane)缓冲溶液中，在 pH5. 5 - 8.0、温度22~40弋的条件下反应2?48h。反应体系中的溶剂、pH、缓冲溶液 的浓度和反应温度都会影响酶的活性，但对酶的选择性的影响比较小。反应过程 中乙腈等有机溶剂的比重不能超过50%，如果超过，溶剂体系会使酶发生改性 而降低水解率。反应温度的升髙会加快反应速率，但会使反应的选择性有所降 低，反应最佳温度应控制在22-40T。
体的4. GV2260，便获得转基因莴苣。从莴苣叶中提取蛋白并做
甜菊苷同时还是很多食品加工的良好配料或加工助料，例如准备腌菜时可添 加烤制后粉碎的甜菊叶子。日本的一个典型用途就是用在调味乌贼鱼制品及其他 鱼制品上。
Brazzein最早由Ming和Henekant于1994年分离得到，它是从非洲植物Pen- tadiplandra Brazzeana Baillon的果实中提取得到的可溶性甜蛋白，甜度是鹿糖的 500倍，后味比糖精弱。
(一）嗦吗甜在食品饮料中的应用
以质量计，相对于2%蔗糖溶液，纽甜的甜度约为丨_倍（以摩尔数计约 为11000倍）；相对于5%蔗糖溶液，纽甜的甜度约为9000倍（以摩尔数计约为 丨_倍）；相对于10%蔗糖溶液，纽甜的甜度约为_倍（以摩尔数计约为 6600倍）。如图2-46所示，以质萤计相对于蔗糖的甜度，纽甜的甜度为1_ 倍，意味着lkg的纽甜相当于l_kg (10t)蔗糖的甜度。从图2-46还发现， 纽甜的相对甜度随浓度的变化而变化。阿斯巴甜的甜度以质貴计为蔗糖的180? 200倍，纽甜的甜度以质萤计为阿斯巴甜的30?60倍。因此，纽甜比任何?种 目前已商品化的甜味剂都要甜很多。
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
(四）双酶-化学联合法（单基团保护法}
