抚州二氢查耳酮
表2 -50所列的一系列L -天冬氨酰-D -丙氨酸酰胺化合物,要比L -冬 氨酰-D-丙氨酸酯化合物稳定得多。无环酰胺和环己基酰胺化合物[81] ~[83]的甜度仅是蔗糖的100倍左右。经过引人刚性分支“下面”基团的化合物[84]~ [91]的甜度得以明M提高。环己基环的C-2和C-6位上简单的甲基 取代,可使化合物的甜度增加6倍,通过对R基团的优选,最后选定2, 2, 4, 4-四甲基-加过《^-酰胺[88]作为新型二肽甜味剂加以开发。这种化合物具有 较好溶解性和比阿斯巴甜更稳定的特性,已被命名为阿力甜(参见本章第三节)。 相应的D -丝氨酸敗胺和0 -甲基-D -丝氨酸酰胺化合物的甜度均要低一些。但 令人奇怪的是,这一系列中的葑基酰胺[91]只有中等的甜度,而前述的L-天冬 UWi-L-甲基葑基丙二酸二酯在酯类系列化合物中具有最大的甜度。
Yutaka Masuda等对奇异果素的cDNA序列进行克隆并测序。测序发现奇异 果素前体由220个氨基酸组成,其中前29个氨基酸构成了一个信号序列。由奇 异果素的d)NA序列推导出的氨基酸序列与纯奇异果素直接测定的氨基酸序列间 有一个氨基酸不同。从cDNA序列分析得到的129位氨基酸为Trp,而经Edmaii 自动降解法测定为Ser。Northern印迹分析显示在RichtMla dulcifka授粉3周后, 编码奇异果素的mKNA就在果实中表达了,并只出现在果肉中。另有报道采用 免疫学方法即用奇异果素抗体检测奇异果素,在授粉8周后才观测到奇异果素。 这两个结果的差别可能是因为奇异果素蛋白质合成时间和奇异果素的mRNA表 达时间不同或是因为奇异果素基因的表达结果的翻译后修饰受到严格的调控。
(一)莫奈林的化学结构
Z-Asp-PheOMe在有机相和水相的百分得率匕、L由溶解在有机相中 乙-六叩的起始萤决定,计算式如下:
(3)阴影框所示为的倌兮序列和B2蛋I1丨氨《?袖部分(SS-B2);粗黑线所示为 KEX2序列:方框中*头所示为嗦吗甜D合成基因(tha) ; T^c,为S. 的转录终止子。
六、利用基因工程法合成阿斯巴甜
关于糖精的安全性试验可归纳如下:
选用三苯中基化和乙酰基化反应,来完全保护蔗糖的8个羟基。具体操作方 法是,在500mL圆底烧瓶中,依次加人20g蔗糖粉(0.058mol)和80mL 二甲基 屮酰胺,磁力搅拌并升温至50?65T使蔗糖完全溶解,再加入24g/V-甲基吗啉 (0.236mol)。分3次在3h内加人56. 8g三苯基氣甲烷(0. 197mol),恒温反应 3.0-4. 5h0
Lamphear等通过转基因玉米生产Brazzein,获得了产萤髙达AOO^g/g种子的 重组Brazzein。研究人员已合成了 Brazzein基因,并把基因融合于植物表达载体, 如组成型启动子(maize polyubiqutin - like promoter)、embryo - preferred 启动子 (maize globulin 1 )和 endosperm - preferred 启动子(maize 22k^, alpha - zein)。其 中,用含embryo - preferred启动子的表达栽体可获得最高的表达水平,产最约达 种子总可溶性蛋白的4%。从80g玉米粉中可提取4.3mg带甜味的f(组Brazzein。 美国Nek丨ai■公司利用转基因玉米生产Brazzein,估计从U玉米中可提取1kg甜蛋 白,国内也有转Brazzein基因瓜果的研究报道。