镶黄旗索马甜
(二）提高反应平衡得率的途径山式（2-5)知反应平衡得率会受底物浓度5。影响。S。增大，平衡得率增 大。在 L/ [H20] =0.5 (mol/L)-1, S0 = lmol/L A,平衡得率提髙至 11.8%，与5。=0.丨》1101/1.时的平衡得率4.55%相比增加不明显。由于通常在羧 基或氨基末端有保护基团的氨基酸溶解度很低，即底物氨基酸浓度不可能增加很 多，因此通过该途径很难大幅度提高平衡得率。这里介绍几种使平衡向肽生成方 向移动的方法。
图2-14表明在等电点下，温度与溶解度 之间呈直线关系。在低于阿斯巴甜等电点 情况下形成盐溶液的趋势，有助于改善溶 解速率与溶解程度，这可通过先往系统中 溶解一种食用酸（柠棣酸、苹果酸等），然 后再加入阿斯巴甜，或者同时加人两者而 得以实现。
由于嗦吗甜有8个二硫键，因此其分子十分稳定，其抗变性能比其他绝大多 数水溶性蛋白（如白蛋白或溶菌酶）都来得强。光谱分析表明，它的a-螺旋度 较低（大约只占整个分子14%),分析其氨基酸组成也可预测到这点。这表明它 并不完全是刚性分子，它的旁链大多处于可溶解的环境中。
(四）双酶-化学联合法（单基团保护法}
因此，甜味的蛋白质受体对甜味分子，尤其是含有强疏水性取代基团的甜味 分子，具有空间结构的要求。这种要求是由蛋白质受体的空间结构所决定的，例 如甜味分子AH、B、X生甜团的构象必须呈顺时针排布可能就是这种空间结构 的要求之一。而实际的空间要求要比这复杂得多，也丰富得多。可惜的是，作为 甜味受体的蛋白质分子至今仍未被成功分离出来，因此这个设想只能等到甜味受 体蛋白质分子的结构被弄清楚后才能得以最终证实。
最后制备6-甲基-3, 4-二氢-1, 2，3-嗯__4-阐-2，2 - 二氧化
的甜味。例如，图6-30所示的3- <3-甲氨酰 -SS-丙氧酸的化学纺构图 基-2，4，6三溴苯）-丙酸，其甜度是蔗糖的4000倍，虽然其甜味刺激有些 迟缓，味觉略有延绵且带有一定的苦味。在这组化合物中，甜度的大小与羧烷氧 基或竣烷基团链的长短有关。三溴苯甲酰胺的部分化合物已在大鼠身上进行了急 性毒理试验，毒性程度大致与糖精和甜蜜素相当。
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
②3个伯位羟基团脱去三苯甲基，消除屏蔽。
