兴宾区阿力甜
仙茅蛋白的异型二聚体（仙茅蛋白丨-2)不仅能产生甜味，而且在水和柠 檬酸存在的情况下还具有味道修饰性能。因此，研究人员推测，C树oiia中的 甜味蛋白实际上是由这种异型二聚体组成的，并把这种异型二聚体命名为仙茅蛋 白 1 -2 或 Neoculin。
甲醇溶液中和至pH =7?8，抽滤，少量甲醇洗涤滤饼，得白色粉末状固体，即
奇异果素单链中有7个半胱氨酸，Hiroshi Igeta等研究认为它们构成了 3 个链内二硫键和一个链间二硫键3 Cvs-47和Cys-92、Cys - 148和Cys-159、 Cys-152和Cys - 155形成了三个二硫键，Cys - 138参与形成一个链间二 硫键。
合成这两种糖的单甲基醚衍生物并品尝，发现在2、3、4或6位置上进行的 甲基取代对甜味均不发生任何影响。综合这些试验和那些脱氧糖试验的结果，可 以确定第3位罝构成ShaHenberger AH、B系统中的B，第4羟基构成AH，第2 羟基构成AH的可能性要小些。因此，吡喃葡萄糖中AH、B系统是位于分子中 比较活泼、很少受干扰的那个部位，它既不包含空间活泼的伯醇基也不包含异构 体中央的端基。
尔比，反应混合物的熔点都在60T以下。复配有机溶剂的加人能保证该酶反应 在37^的均相中进行有效的反应。图2 -67 N-苄氧羰基-L-天冬氨酸乙酯和D -丙氨酰胺 按不同比例混合对反应混合物熔点的影响 注：12%的水.9%的DMSO和18%的MEA为辅助因子。
②是构象确定的味觉改性剂的精神物理 学试验结果。
20世纪60年代以来，人们从热带植物果实中发现了多种高甜度的天然蛋内 质（表5-1)，它们是嗦吗甜（Thanmatin)、莫奈林（Monellin)、马槟榔 (Mabinlin)、Brazzein、Pentadin、Curculin 和奇异果素（Miracu丨in)。另一种糖蛋 白Miraculin本身并没有甜味，但可使酸味变成强烈的甜味。
在嗦吗甜I、A、B基因的y端，加上3-磷酸甘油活化酶（PGK)启动子， 在3'端加上PGK终止子作为转录终点和多聚腺苻酸信号。将嗦吗甜基因试剂盒， 克隆至及co/i-酵母间的运送载体，质粒pJDB209。由于嗦吗甜基因在￡：.?>/〖和 酵母中都能复制，因此既能在中对基闽进行操纵，又能在酵母中对基闪进 行功能测试。但质粒PJDB209含有一个leu2 - d标记，使办-异丙基苹果酸酯脱 氢酶在酵母中的表达水平较低^将带嗦吗甜基因的质粒转移至突变株中， 这样由于约每200个酵母细胞完成一个突变，因此嗦吗甜基因试剂盒利用 率也提髙了约200倍，基因表达水平也相应提高。
控制下表达得到苯丙氨酸和天冬氨酸的聚合体。该聚合体可以用不同蛋白酶， 如可溶性或固定化胰凝乳蛋白酶、水溶性或固定化枯草杆菌蛋A酶Carlsberg、 可溶性蛋A酶K和可溶性蛋内酶嗜热菌蛋白酶水解得到多肽，但这些酶都不 能专一水解得到Asp-Phe。可溶性枯草杆菌蛋甶酶Carlsberg或蛋白酶K的催 化专?性不强，得到的水解产物为ASp-Phe、Phe-Asp和其他由这些二肽聚 合的低聚物；用固定化枯草杆菌蛋白酶催化得到的结果最好，水解产物中绝大 部分为Asp - Phe。
