东营罗汉果苷
糖其余游离羟基活性被钝化，而最活泼的c-6羟基此时尚有反应活性。此时， 利用乙酸酐对C-6进行酯化，从而实现了单基团保护。但因为化学反应没有专 一性，故反应产物仍很复杂，只能得到以C-6单酯化为主（50%左右）的混合 物，故此时需要高效的色谱分离手段加以精制处理。
Sun等尝试了在转基因马铃磐中生产重组马槟榔。研究人员把全长马槟榔基 因克隆于带马铃薯块茎特异性patatin启动子和来&胭脂碱合成酶基因的终止序 列（NOS. sub. ter)或带CaMV 35S启动子和NOS. sub. tei■的栽体，并把基因和栽 体转染至马铃薯。他们用Southern印迹法分析了转基因植物并通过Northern印迹 法证实了马槟榔n被成功转录。
以核糖体蛋白质L41基因为标记，将用32P标记的含C. makosa的RIM - C基 因的Xbal -Sau3AI片段与Candida utUis ATCC9950的基因组DNA进行DNA杂交 分析，结果表明存在一个与KIM - C基因同源的基因。对Candida ut'dis ATCC9950的DNA用Sau3AI进行部分切割后的片段（5~10kb)转人经BamHI 酶切的质粒PBR322构建基因组DNA文库，用RIM - C基W探针对约30 000个 克隆子进行筛选，筛选得到5个正（positive)克隆子，对其中3个质粒构建了 限制性酶切谱图（图5-11)。该同源基W在质粒DNA上的大致位置通过对质粒 的限制性酶切片段进行DNA杂交分析得到。将能与探针杂交的4kb EcoRI片段 双向亚克隆至质粒pBluescript II SK进行DNA序列分析，现已测定广含L41基因 的2086hP的BamHI - SacI片段的DNA序列（图5 - 12),其排序策略如图5-11 所示。
②丨4个单代动物试验（包括几种受试动物）的结果均表明，即使摄入相当 高剂量的糖精，也不会诱发任何器官的癌变。
分离提纯过程，主要根据嗦吗甜的水不溶性及电荷特性进行。阁5-4所示 为从酵母中分离提纯嗦吗甜的流程图，得率达80%，纯度>95%。在该流程后， 还可以冉进行SDS凝胶电泳或在离子交换层析后，在lOOmmol/L醋酸中进行 SP-SphadexG-75凝胶过滤，去除少萤杂蛋白。提纯结果表明，转化酵母中的 嗦吗甜约占不溶性蛋白质的20% (或总蛋白质的10% )。
总之，三肽化合物的甜度比大小相似的二肽化合物低。三肽分子之所以会损 失甜度，可能焙因为亲水性的增加以及构象的限制，使得其整体分子的形状与大 小均未处于最佳状态的缘故。Ariyoshi进一步研究了四肽和五肽化合物，在所研 究的14种四肽中有3种的甜度仅是蔗糖的0.5 ~5.0倍，7种五肽没有甜味（表 2-66)。这表明低聚肽的分子越大，接近甜受体就越困难。表2 -66 二-五肽化合物的结构与甜度
糖屎病人摄人的糖精蛩比普通人多得多，食用时间也比较长（25年甚至更 长>，虽然如此，糖尿病人的癌症发病率并没因此而增加。其他研究，或着眼于 膀胱癌的发病率与糖精摄人是否有关，或检査已患膀胱癌症的病人是否有过萤摄 取糖精的现象，所有这些研究均表明人体膀胱癌的发生与糖褚没有直接的联系。
迄今为止，AH - B -X甜味三角理论最适合用来解释蔗糖衍生物等甜味分子 的甜味机理，认为甜味分子与受体蛋白，?分别通过两个氢键和一个疏水键进行相 互作用，产生甜味刺激，也称为三点结合理论（the three - point attachment theory ) 0
图2 -49和图2 - 2分别为纽甜和阿斯巴甜在人体的代谢途径。纽甜进人人 体后，约有一半以3，3-二甲基丁基天冬氨酰苯丙氨酸（DMB-Asp-Phe)的 形式由粪便排出体外；另一半被原封不动地吸收，然后再进一步水解成DMB- Asp-Phe和甲醇。这其中的大部分DMB-Asp-Phe (半衰期为2h)是通过尿排 出，而不会在任何组织中有较多的残留；另外只有一小部分被机体代谢，通过氣 化3，3 - 二甲基丁基部分形成3, 3-二甲基丁酸，作为人体的一种肉碱醋 (Carnitine ester,少于纽甜摄人量的5% )由尿液排出。值得注意的是，阿斯巴 甜的代谢分解与纽甜有很大不同。阿斯巴甜在肠道的内腔或黏膜细胞中就分解成 3种成分^天冬氨酸（Asp)、苯内氨酸（Phe)和甲醉。这些成分被吸收，进 入人体静脉循环，进人氨基酸代谢循环中。因此可认为，阿斯巴甜被完全代谢吸 收，而超过90%的纽甜都是通过排泄物排出体外的。图2-49 纽甜的代谢途径 (1)主代謝途径（>90%)(纽甜转化成其?水解衍生物DMB-A卬-Phe,由粪便或屎液排出） (2)次代谢途椏(< 10% ) [DMB-Asp-Phe的3, 3-二甲幕丁基部分 被氣化成3. 3-二中基丁酸.作为肉碱? ( <5% )由尿液排出]
