天柱县阿力甜
采用电穿孔法，将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究，酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小，使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体（4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度），进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为：2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂，使细胞对渗透压更敏感，因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基，也不能得到CYH抗性菌落，需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后，再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
研究甜味理论及其构效关系的目的，不仅在于阐明甜味的呈味机理，更重要 的是指导合成新型的人工甜味剂。近百年来，几种重要人工甜味剂的发现均出自 偶然的机遇，如1879年的糖精（Saccharine)、1883年的甘素（Dulcin)、1893 年的甜素（Gliicin)、1937年的甜蜜素（Cydanmte)和1965年的阿斯巴甜 (Aspartame)都是著名的偶然事件，而通过精心设计而成功发现的人工甜味剂则 几乎没有。
在反应过程中通人氮气，并在冷凝管上接干燥管，以确保反应体系绝对无水。
酵母生产的嗦吗甜并不全部分泌在培养基中，有很大一部分留在细胞内。胞 内嗦吗甜（thaumaternal)与成熟嗦吗甜的分子质量相同，这表明它通过内质网 进入了分泌途径，但未通过商尔基体和囊泡完成整个传输过程。胞内蛋白既无免 疫特征，也无甜味，约占总嗦吗甜的50%。
邻甲基苯胺法所用原料为邻甲基苯胺、亚硝酸钠、硫酸、铜粉、二氧化 硫、液氣、氨水、活性炭、液体氢氧化钠、盐酸、髙锰酸钾、亚硫酸钠和碳 酸氢钠等，主要化学反应有：觅氮、置换、氣化、胺化、氧化、酸析与中 和等。
Prekash等利用催化剂还原/V-烷基化反应制备纽甜。将阿斯巴甜与
以显著提髙，在高于pH3环境中性质稳定，且不带任何不良后味。SRIOximeV 没有诱变性，让小鼠经口摄人测得半数致死最LDso大于丨g/kg。在小鼠、狗和罗 猴身上进行的研究表明，它经口摄人后可被机体吸收并进人代谢途径中。主要代 谢产物来源于甲氧基平基或醛肟部分的氧化作用，并在48h后定谊排泄出。亚慢 性毒理试验表明，小鼠摄入含0.6%SRI Oxime V饲料持续8周未发现明显的毐 副作用。据分析，如果慢性毒理试验结果满意的话，SRI Oxime V作为一种人工 甜味剂是有发展前途的。
阿斯巴甜前体作为一种二肽化合物，理论上可以采用重组DNA技术进行生 产。该法生产过程首先是采用重组DNA技术合成了阿斯巴甜前体Asp-Phe (图 2-27),然后再对苯丙氨酸的羧基进行化学酯化反应即可得到阿斯巴甜。
Wingwanl等人和DuBois等人用活体外试验证明小鼠盲肠微生物群能将甜叶菊 分解成甜菊醇。他们在小鼠盲肠中引入[MC]标志的甜菊醇，并从结扎的胆汁导 管和尿中回收到。Wingward等人认为甜菊醇是通过小肠吸收的，这个结论为 Nakyama等人的体内试验结果所证实。Nakyama的试验表明，虽然经氚标志的甜菊 苷未经任何吸收通过小鼠肠逬，但盲肠中的微生物群能将之分解成甜菊醇和葡 萄糖。
糖精Saccharin,是从拉丁字母Saccharum转变而来的。它是1878年 C. Fahlherg和I. Remsen在Johns Fahlberg大学进行邻磺胺苯中酸氧化研究中发现 的。Fahlberg为此申请了美国专利319082。1884年美国、1885年英国和1899年 德国相继建厂生产。
