枣庄木糖
(一）3, 3-二甲基丁醛（DMBA)的制备
多点结合甜味理论1991年，Tinti & Nofre提出了著名的多点结合甜味理论（the Multipoint Attachment Theor) ) 0该理论认为，人体甜味蛋白受体最少包含八个基本的识別 部位，这些识别部位与甜味分子相应的结合部位发生相互作用，从而产生甜味 刺激。
③糖精既不会在体内代谢（它通过体内却不发生任何变化），也不会与 DNA发生反应，这意味着糖精并不具备典型致癌物质的两大主要特征。
将峰值m分在pH8、2nnn0丨/Ltt妖的嚷堪丨丨丨烷盐酸绥冲液（经Ot排气） 稀释至2(^8/011^然后在4t：保持20h
将 20g4-PAS (0.036mol)加人 100mL 含 2 ~ 10mL 乙酸（0.035 ~0. 175mol) 的甲基异丁基酮中，加热回流3?4h,部分浓缩。冷却此溶液到601，加庚烷冷 却结晶，经洗涤干燥得到固体产物，为2，3，6, 3\ r -五乙酸蔗糖醋 (6-PAS〉。
在二相体系合成Z - Asp - PheOMe的反应平衡的理论关系可按照Martinelc和 Semeno提出的类似方法推导。在推导过程假定在有机相中的底物和缩合产物都 是非离子形态，且在有机相中Z-Asp-PheOMe、PheOMe之间不形成复合物， 带离子型羧酸侧链和非离子型C端的Z - Asp组分忽略不计。二相体系的反应平 衡常数计算式如F:
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
2.奇异果素的四聚体模型
引入亚甲基的化合物[78]，其甜味完全丧失。异冰片基化合物[79]与葑 基化合物[77]只在一个成对的甲基团位置上有所差异。但前者甜度仅是后者 的1/80，这是由于一个碳桥上的甲基干扰了化合物与甜受体的相互作用。最近 又发现了一些新的属于这类化合物的例子（如[80])。
