古丈县异麦芽酮糖
(-)柚苷二氢查耳酮（I)的生产技术
合成时，.首先将L -天冬氨酸与甲基乙基磺酸酯在45 下于NaOH-CH3OH介质中反应生成硫碳氨基甲酸乙酯，后者于25*C下与PBr3反应得 到稳定的衍生物L - Asp - NTA晶体，得率高达90%。将L - Asp - NTA与 L - PheOMe ? HC1在特定的pH与温度下缩合生成纯净的a - Asp - PheOMe (阿斯 巴甜），得率63%。这种缩合反应只生成构体-?种产物，具冇很大的优越性。
从图4-8可以看出，在加酶敏-定的条件下，淀粉投料虽达到一定程度后 对转化效果影响不大。当淀粉与甜菊苷质置比为1:1时，再增大淀粉用量，总转 化量不变，但环糊精的含景会随着淀粉量的增大而增大。由于环糊精（主要为 办-环糊精）具有分子包络作用，因此会影响转化产物的甜质。对淀粉/甜菊苷 质量比为1:1和3:1的两个反应体系的产品的口感进行比较，后者明显好于前 者，与普通蔗糖溶液基本相近。这一结果表明，增大淀粉用最，虽然对转化效果 影响不明显，但同时形成的大量环糊楮及环糊精包络化合物有助于改善转化物 甜质。
20世纪80年代中期，国际上曾组织16位知名专家组成的专门小组，对三 氣庶糖的安全性问题进行权威的评判。这16位专家分别来0毒理学、肿瘤基因 学、临床毒理学、基因毒理学、代谢学、生物化学、遗传毒理学、生理学、营养 学、血液学、儿科学、毒理评价学、神经毒理学和免疫学等各个领域。他们对所 提供的毒理试验数据进行专门的讨论和审议，最后确认“三氣蔗糖对于广泛的 用途来说是安全的”。美国FDA于1998年3月21 R批准三氣蔗糖的食品添加剂 地位，1994年世界食品添加剂联合专家委员会（JECFA)批准的三氣蔗糖ADI 值为 15mg/kg。
用冰?酸调丨’/pH罕3.5。在含EDTAO.Immo丨/L .醋酸lOOmmoI/L的混合溶液 中进行Scphadcx G-25tt ( 2.2cmx45cm ) ?胶过滤.检测足污有蛋白质
1.甜味分子结合部位不同甜味分子的结合部位可以少于八个，通常都超过三个结合部位，只有少 数低甜度物质如甘氨酸、1, 2-乙二醉通过三个结合部位与受体蛋白结合。除了 结合部位D，其他结合部位均由两个亚结合部位（又被称为结合点）组成，这 些结合点分别B,、B2、AH,、AH2、XH,、XH2、G,、E,、G2、E2、G3、E3、 g4、e4、d,通过离子键、氢键和空间立体作用（范德华力）等三种作用方式， 与受体蛋白相应识别部位发生相互作用，见表1-2。
1.酶制剂的选择已知具有糖酶活性（如葡聚糖酶、蔗糖酶以及《-、卢-半乳糖苷酶等）的 50多种商品酶制剂，人们都已进行了水解6，4\ 1' 6W-四氯-6，4\ 1\ 6"-四脱氧半乳棉籽糖（TCR)的《-1，6糖苷键的活力测试，但结果并不理 想。这些酶制剂包括4种从植物中获得的a-半乳糖苷酶，以及7种从细菌和霉 菌中获得的《-半乳糖苷酶，其中只有一种商品酶制剂，即半纤维素酶对TCR 具有活力，但水解速度非常慢。为此，人们转向从微生物中寻找能水解TCR的 a -半乳糖苷酶。
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
纽甜在结构上类似于阿斯巴甜，但是由于纽甜分子中含有3, 3-二甲基丁 基团，能够几乎完全阻断用来打断天冬氨酸和苯丙氨酸之间肽键的肽酶的作用， 从而减少了苯丙氨酸的形成。因此，纽甜对苯丙酮酸尿症的患者不需要作特殊的 商标注明。
然而，鉴于两代白鼠试验发现了明显的膀胱癌变，似乎没有一个国家认为可 以无限里地使用，丹麦、荷兰等国家仍严格限制它的使用，世界食品添加剂联合 专家委员会也将原先同意的糖精AW值0?5mg/kg减少到0. 0-2. 5mg/kg,并取 消了有条件的0~15mg/kg。
