天河区爱德万甜
如图丨-31 (1)所示，自由态I和自由态n之间的平衡可以通过结合小分 子甜味剂（结合小分子甜味剂使自由态I转换成与自由态n结构相同的复合态) 而改变，使Q由态I向有利于形成活性态的方向转化。但是，如果可以通过另外 的方式来稳定自由态n，那么也同样可以改变形态I和形态n之间的平衡。图
糖精(=J前仍主要应用在软饮料。美国约有60%的是用在饮料上的，有20% 的是用在口香糖、果冻等其他食品，还有20%的用在餐桌甜味剂上。在我国， 糖精可以用于酱菜类、复合调味料、蜜饯、配料酒、雪糕、冰淇淋、冰棍、糕 点、饼干和面包，最大用量为0.15g/kg;糖精汁、果汁（味）型饮料按稀释倍 数的80%加人；婴幼儿食品不得使用糖精。果酒、露酒、黄酒、啤酒、白酒中 禁止使用糖精。肉类、水产类、水果蔬菜类罐头中禁止使用糖精。用于瓜子时最 大用量为1.2g/kg;用于话梅、陈皮类为5.0g/kg,可与规定的其他甜味剂混合 使用。
用异香草醛（3-羟基甲-4-氧基苯乙醛）与\11缩合可得到新橙皮苷。在 一个典型的试验中，将VI (5. 64g)添加于热的氢氧化钾溶液中（12g氢氧化钾 溶于12mL水），罝于沸水浴中，异香草醛（2.82g)可分次加人。加热约7min 后，用70g冰冷却溶液，调节pH至5. 7,然后置于冰浴中过夜。这样生成的沉 淀物主要是新橙皮苷査耳酮。收集沉淀，水洗，气流干燥之。为了使其环化成黄 烷酮，可将它重新溶解于70mL的水中，先在80 下持续30min,然后在 401下维持3h，真空干燥后可得到纯净的新橙皮苷晶体（熔点241?242T，产 ft3. 17g)。少量未反应的\U，可用冰浴冷却后过滤去除。
Miyashi丨a 等人应用 SIMCA 模式识别法（paHern recognition method)分析了 108种二肽同型物。分析时考虑到“大小”（摩尔折射系数）、“形状”（Sleri- mol)和“带电”（c。F-个W素的影响。最后表明，“大小”和“形状”是影 响甜度的两个重要因素，而带电因素并不重要。
(四）结合甜蛋白活性位点的楔形模型
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
如表2-58所示，用D, L-氨基丙二酸（Araa)取代L-天冬氨酸是改变 /V -端氨基酸而又能保留甜味的第一个例子。Ama分子中氨基与竣基的关系与 通常氣基酸的一样，符合Shallenberger和Acree的AH 一 B理论。用D，L - Ama 取代天冬氨酰苯丙氨酸甲酯分子中的L-天冬氨酸制得的二肽衍生物[126],其 甜度是蔗糖的300 ~400倍，也有人报道是“200倍”或“相甜”。Ariyoshi指出 甜味非对映体可能是D-Ama-L-Phe-OMe，而不是L，L-非对映体。由于手 性中心取代基次序优先性的变ift, D-Ama的绝对构型与L-Asp是一致的。后 来，应用类似的方法制备出D，L-Ama-D-丙氨基酯。D，L-Ama-异丙基
甘草甜素为白色结晶性粉末，分子式C42H62Ol6，相对分子质鱼822. 92。与 二氢查耳酮相似的是，其甜刺激来得较慢，去得也较慢，甜味持续时间较长。少 世甘草甜素与蔗糖共用，可少用20%的蔗糖而甜度保持不变。甘草甜素本身并 不带香味物质，但有增香作用。熔点（分解）220T，水溶液呈弱酸性，在酸作 用下会水解失去甜味。甘草甜素难溶于水和稀乙醇，易溶于热水，冷却后呈黏稠 状胶冻。不溶于油脂，溶于丙二醇。
