新县甜蜜素
表4-S 葡糖基转移酶处理前后甜叶菊提取物甜味成分的变化单位：质量分数
阿力甜的主要代谢产物对实验动物和人体來说均是正常的代谢产物，这也有 力地支持了动物试验的可信度。毒理评价期间的累积数据表明，在申请承认食品 甜味剂地位的报告中，假设阿力甜作为惟一甜味剂所要求的平均长期日摄取贵
0.1 -0. 4mol/L NaH2P04 (或 MES 或 Bis Tris propane)缓冲溶液中，在 pH5. 5 - 8.0、温度22~40弋的条件下反应2?48h。反应体系中的溶剂、pH、缓冲溶液 的浓度和反应温度都会影响酶的活性，但对酶的选择性的影响比较小。反应过程 中乙腈等有机溶剂的比重不能超过50%，如果超过，溶剂体系会使酶发生改性 而降低水解率。反应温度的升髙会加快反应速率，但会使反应的选择性有所降 低，反应最佳温度应控制在22-40T。
+NH2S0,Na ?QH.jNHSOjNa + NH3 t
热水似乎焙用于提取的较好介质，特别是味觉特性较好的甜菊双糖苷A在 热水中的溶解度要比甜菊莳大。然而，也有几篇专利描述了溶剂提取法的优越 性，这些溶剂包括乙醇、中醇、氣仿、甘油、山梨糖醇或丙二醇等。有时也用氢 化水解淀粉液作为提取溶剂。
以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针，与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照，对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明，在各转化体的表达盒没有发生重 排，各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
(2)只有用含甜蜜素高于丨％的饲料喂养大鼠，才出现体重下降现象。 在喂养小鼠时也发现相同的情况。以4g/kg的甜蜜素钠盐喂狗30(丨或以 1.5g/kg的甜蜜素钠盐与糖精钠以10: 1混合的混合料喂狗2年，没有发现狗 生长受抑制现象。以200mg/ (kg ? d)的甜蜜素钠盐喂雌糇5年以上，也没 影响其生长。
围3-2 =氣蔗糖在水和乙醇中的溶解度
culin 酸性亚基 (NAS)或仙茅蛋白2。相应的，原来所发现的成分仙茅蛋内单 体，则被称为NBS或仙茅蛋白丨。用蛋白质测序仪测定NAS的氨基酸序列，发 现NAS为一个含有丨13个氨基酸残基的、N端被糖基化的酸性亚基。NAS的核 苷酸序列也已被测定。推测所得的氨基酸序列表明前体NAS-1由158个氨基酸 残基组成，且包含一个信号序列的22个氨基酸和C端扩展区的23个氨基酸残 基。NAS和仙茅蛋白的氨基酸一致性高达77%。
二肽甜味剂对N-端氨基有严格的要求，首先它必须是两性离子，而且必须 与带电基团保持一固定距离，因为只有这样的二肽分子才符合Shailenberger和 Acree提出的AH-B甜味理论模型。1972年，Kiei?在著名的Shailenberger甜味 AH/B模型上引人X基团，提出三点结合生甜理论（AH-B-X)，该理论沿用 AH+为能提供氢离子以形成氢键的基团（区域），B-是能为构成氢键提供所需 氧负离子的基团（区域），此外，引人的X是通过亲水或疏水特性与上述两块区 域相交，并在甜味感知中起到强化作用甚至决定性作用的基团（区域）。
