克井镇索马甜
五、利用固定化酶法合成阿斯巴甜
质粒pCLRM216、pRMll、pUMll的转化体，在lOmLYPD培养基中培养后, 均能产生莫奈林。凝胶定虽扫描表明，奐奈林在pUMll转化体中的表达世，超 过可溶蛋白的50%。以141基因为探针对转化体进行DNA印迹分析，测定 pCLKM216的整合拷贝数为10?丨丨，PRM丨丨为12~丨8，pUMll为20?22。经 DNA印迹分析，确走pKMH和pUMll中没有细菌序列。
②C-6位羟基化学保护法（单基团保护法）；
R.COX + NH2R2— R,CONHR2 + XH (2-1)R,、R2分别指末端氨基和羧基带保护的氨基酸的非酸和非胺部分。根据X 的不同，反应可分为三类：当X为一OH时，为水解反应的逆反应即缩合反应; X为一 NH2时，为酰胺的氨基分解反应（转酰氨基反应）；X为一OMe或一 OEt 时，为酯的氨基分解反应（也可称酯化反应）。其中缩合反应最重要也最适于阿 斯巴甜前体的合成，将作详细介绍。
甜菊苷的毒理试验于20世纪20年代起源于日本Hokkaido大学，自20世纪 70年代起，日本、美同、韩国和巴西等国家都进行过这方面的研究。
Prekash等利用催化剂还原/V-烷基化反应制备纽甜。将阿斯巴甜与
③环原酸酯法（单基团保护法）；
马槟榔蛋白II及其同工蛋白（I、1-1、ID和IV)的cDNAs都已克隆并测序 了。马槟榔iv的c端比in少4个氨基酸，因此它可由马槟榔in得到。马槟榔n 的前体由155个氨基酸残基组成，其中包括信号序列的20个氨基酸、N端延伸 肽的15个氨基酸、A、B链之间连接肽的14个氨基酸残基和C端延伸区的1个 氨基酸残基。序列分析表明n刚形成时两条链中插入了 14个氨基酸组成的连接 序列形成单链，然后在蛋白质成熟过程该连接序列被切除。也有通过载体 pET - 15b已将马槟榔的基因转人大肠杆菌中表达。
为了改善嗦吗甜的甜味特性，可以将它与其他甜味剂相混合以缩短其甜味持 续时间。或把它应用在那些能够充分发挥这种甜味剂优点的产品（如口香糖）， 这样就不需对之加以改性。
