盐边县甜蜜素
内氢键。在此,3^-OH是供体,而2-0H是受体羟基团(图3-51)。这个键 还能对葡萄糖基和果糖基之间的共同氢键网络(3 - 0H--2 - OH- r - OH "4'- OH)起到稳定化作用,随着网络的进一步扩大,分子间氢键强度增加,然而在 稀溶液中分子间氢键可能被断开,以允许分子间糖苷键的旋转。
(一)阿力甜的化学结构阿力甜(Alitame)的化学结构如图2-58所示,它由L-天冬氨酰、D-丙 氨酸和C -端酰胺三部分组成。C -端的酰胺是由2, 2, 4, 4 -四甲 基-thienanyl-胺转化而成,它是形成阿力甜髙甜度特性的关键因素。在研究过 程的I.-天冬氨酰-D -丙氨酸-酰胺同型物中,分析认为对髙甜度特性有益的 结构特征:
围上标明r突变的位e及带来的甜度变化 (红色,表示甜度增强;黑色,表示甜度不变;浅蓝色,表示甜度减弱;深蓝色,表示甜度与水相同)
首先用标准三醋物方法(standard triester methodology),合成2个部分互补 的含12个核苷酸的短链:① d ( TpCpGpApApApTpCpGp ApApG)② d ( TpTpTpCpGpApCpTpTpCp GpA)
图5-4 酵母嗦吗甜提纯工艺 (DTT 为 dithiothroitol)
B链的Asp残基被Asn替换后分别得到[ASnKl ]-莫奈林和[ASnw ]-莫 奈林的类似物,它们的甜度分别是蔗糖的7000倍和20倍,而用Abu替换Asp117 得到的类似物[Abi^]-莫奈林完全没有甜味。这表明:位于《-螺旋内的 Asp821被Asn替换后,可能会引起莫奈林分子构象的微小变化,或者更有利于结 合受体;ASpOT位于莫奈林分子内a-螺旋的起始部位,在分子的表面有游离的 办-竣基,能以离子键的形式与受体相结合,可能是莫奈林的活性部位; [Asnm]-莫奈林之所以也具有部分甜味,可能是Asn87与受体以氢键的形式相结 合的结果。此外,还对英奈林仅有的一个CySw的作用进行研究,结果发现:用 Ser替换Cy8w后,得到的[Ser8^ ]-莫奈林类似物的甜度是蔗糖甜度的2000 倍,并且该类似物在水溶液中的稳定性明显下降,与人工合成的莫奈林的构象略 有不同。可以肯定,Cys残基上的一SH基团在保持莫奈林的天然甜味构象方面 起着重要的作用。
各质粒的启动子分别是:zlcre/no/iium chrysogenum的B2广谱醋酶基因 (cesB )的后动子(pBKThb )、PeniciUium chrysogenum的异青毎素合成酶 (pcbC)启动子(pCKThb)、Aaimmon的谷氨酸脱氢酶基因(gdhA)后动子 (pGDTli)和/的3 -磷酸甘油醛脱氢酶基因(gpdA)启动子 (pGPTh)。各质粒$至经ble标记选择得到的/l.a?;amon>/66菌株,该菌株没有 曲霉蛋白酶 A (aspergillopepsin A, PepA)活性。
起初,甜蜜素的生产仅限于美国伊利诺伊州芝加哥的Abbou实验室。生产 方法是通过环己胺(C6H?NH2)磺化成环己基氨基磺酸铵或环己基磺酸化环己 基胺,后经Ca ((^)2或仏(^跫换而成。
苯酐法生产糖梢钠的工艺流程见 图 6-12。
(-)两相体系中Z-Asp-PheOMe的合成反应动力学 要定量分析两相反应,首先需弄淸下列关系:①固定化酶催化反应在水相中进行,因此需了解反应在饱和有机溶剂缓冲 液中的动力学和平衡关系;②底物和产物在水相和有机溶剂中的分配比;③分配比引起的水相pH变化;④水相、有机相之间物质传递产生的影响;⑤酶在界面吸附引起的变化。