桂阳县果糖
反应，且沸点较高以保证完全諷化，最好在80弋以上。
本节主要介绍采用嗜热繭蛋酶催化合成阿斯巴甜前体的研究。(2)内肽酶(Endopeptidas) 可将W -苯甲酰-L -天冬氨酸-a -甲酯与 L -苯丙氨酸甲酯缩合生成带苯甲酰基的a - Asp - Phe0Meo(3)木瓜蛋白酶在乙酸乙酯溶液中将苄氧羰基-L-天冬氨酸与苯丙氨酸 中酯缩合生成带苄氧羰基的阿斯巴甜。木瓜蛋内酶甚至可用外消旋的D, L-苯 丙氨酸甲酯起反应，而只生成L-型产物。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(BaciUus stearothermophUwO的中性蛋白酶可将苄 氧羰基-L-天冬氨酸与苯丙氨酸甲酯盐酸化合物缩合生成带保护基的阿斯 巴甜。(5)金黄色葡萄球菌(^taPhylococc似aurcwO的蛋白酶可用不带保护基的 L -天冬氨酸-? -甲醋或a -酸氣与L -苯丙氨酸甲酯缩合生成阿斯巴甜。
考虑到安赛蜜水溶液温度与溶解度的关系，因此所得产品可通过重结晶方法 很容易地得到纯化，这就保证了工业化生产规模下能够制出髙纯度的安赛蜜，以 满足作为食品添加剂的纯度要求。
过髙浓度的纽甜可降低膳食的可口性（尤其是对大鼠和小鼠而言），试验动 物在体重高峰期间，与对照组比较时出现了轻度、持续地食物消耗减少（图 2-53)。而在一个较大的纽甜剂量范围内，动物的食物消耗量减少、体重降低 和体重增长减慢没有剂量依赖关系（图2-54)。这类与膳食的可口性有关的影 响在其他物质的毒理学试验中同样可以观察到（包括具有很觅味逬的其他非营 养类增甜剂），并非是纽甜所独有的。当一种的食物具有充足的营养，但是可口 性变差时，动物只吃少量食物仍会保持适当的营养。因此当大鼠面对可口性较差 的食物，它们仍会食人少量：，这种由于摄人食物减少所导致体重改变的现象并不 是副作用。然而，这种情况对安全性试验的结果有不利影响，因此食物的可口性 在安全性试验中是一个重要的考虑因素。
等，属于食品的天然成分。
折吞复性试验表明：嗦吗甜不仅还原变性不容易，折叠复性也很闲难。在折 祛过程中，变性蛋白质的疏水作用和16个巯基间形成的不规则二硫键使大部分 变性蛋自发生凝聚，因此植物嗦吗甜折奋必须在极低浓度并且可控的条件下缓慢 进行。但即使天然嗦吗甜初始浓度为2(Vg/mL，最后总得率也只有约1% (O^jtg/mL),仅能被WA或高度浓缩后进行品尝试验才能测定。鉴于这些试验 成效小，因此需要寻求低成本且更髙效地从变性酵母嗦吗甜中得到天然结构的 方法。
当研究一类蛋白质的共同功能的起源时，研究人员一般都是通过比较序列 和/或三维结构来寻找这类蛋白质成员的对应部分。然而，人们至今仍未在莫奈 林、嗦吗甜、Brazzein、马槟榔、奇异果素和Curculin中发现序列同源性。通过 Clustal X得出的双序列比对结果表明，莫奈林和其他甜蛋白（嗦吗甜、Brazzein、 马槟榔、奇异果素和Curculin)的相同残基百分比为：莫奈林和奇异果素之间 23% ,莫奈林和Curculin之间仅为7%。如果把鸡蛋淸溶菌酶也考虑进去，那么， 所得的结果[图1-30 (1)]是这些蛋白质完全不存在对应性（mis-alignment): 仅有3个部位具有少许同源性。即使把序列比对仅局限在三种最甜的蛋白（莫 奈林、Brazzein、嗦吗甜>，也只能发现2个相同部位和12个具有同源性的部位 [图 1-30 (2)]。图1-30 甜味蛋白的序列比对 (I)典奈林、嗦叫甜、BraHein、4槟梅、奇异果家、仙茅蛋甶和鸡蛋淸溶菌酶的比对 <2)奂奈林、嗦吗甜和Bra/zrin的比对比较现有的甜蛋白（莫奈林、嗦吗甜和Brazzein)的三维结构，也儿乎没宥 发现它们之间存在任何的相似性。Brazzein、莫奈林和嗦吗甜三维结构的惟一共 同点是二级结构的一个小K域，即符合甜味指要求的办-折登发夹结构，这一结 构具有已在小分子甜味剂所确定的生甜团。
(5)限制件酶切位点缩写分别为：H, Hind丨；B. Bamll I ； S, Sal I ; X, Xba I ; N, Nco |。
要使表达系统的表达水平较髙，则必须选择一强启动子。以Escherkhia coli lacZ为报告基因，发现C. ulULs的GAP启动子比C. utilis的PGK启动子的 效率高几倍。W此用的部分GAP基因（TDH3 )作为探针从
