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②分子能够同时缚住两种受体.并激发之产生两种味。
4'-氣-4'-脱氧-三氣蔗糖的C-3'和C-4'的构象颠倒,将降低甜度。因 此,4-氣-4-脱氧-?-D-P比喃半乳糖_1, 4, 6_三氣-1, 4, 6-三脱氧 -冷-D-山梨呋喃糖的甜度(200倍)只有果糖苷异构体(2200倍)的1/10。 分子间糖苷键C-l -0-C-2澌近的刺激分子的构象柔韧性,使得异构化;T- OH作为AHs参与氢键形成,而4'-C1则远离受体部位(X!)。甜味分子与受体 蛋内的相互作用[3f-OH (AHs) /2-0 (Bs), l'-Cl (X:)和4-C1 (X:)], 只存在两个疏水结合部位,见图3-56,而果糖苷异构体含有四个疏水结合 部位。
这些实验结果还可探讨莫奈林的甜味活性区域。重组SCM可像天然莫奈林那样 产生甜味反应。研究人员已通过生产规模装置,利用酵母菌株AB110对SCM进 行了大规模的生产和纯化。SCM基因是被克隆于携GAPDH或ADH2启动子的 pUC栽体的。把带有ADH2启动子的菌株S于450L中试规模的发酵罐进行发酵, 最终可获得54g具有甜味的纯化重组SCM。
研究表明,甜味受体是类似于谷氨酸受体、Ca2?敏感受体、y-氨基丁酸B 型受体和信息素受体的C族G蛋A偶联受体(GPCR)。所有这些G蛋白偶联受 体不仅都有一个7-螺旋跨膜结构域(7TM),而且还有一个含典型配体活性位 点的大胞外结构域——Venus flytrap结构域(VFTD),以及一个半胱氨酸富 集域。
九、嗦吗甜的应用
SDS - PAGE和Western印迹分析。结果表明,重组奇异果素通过SDS - PAGE处理 后具有和植物奇异果素?样的迁移率,并且它也和植物奇异果素一样地被糖甚化 了。转基因莴苣中的奇异果素含谊为33.7~43.4叫5/8鲜重。重组奇异果素具有和 植物奇异果素相似的强甜味诱导作用。但是,与多数转基闪植物的情况一样,这种 转基因窝苣在后代的表达水平并不稳定,宽组奇异果素的产量要明显降低。
六、纽甜的应用纽甜是一种非营养型无能量的甜味剂。已知阿斯巴甜的能里:值为16.7kJ/g, 而纽甜中约有75%是由阿斯巴甜制成的,由此可推出纽甜的能虽值约为12.5kJ/g。 但实际上,只有少于10%的纽甜在体内通过次代谢途径真正被吸收。这表明纽 甜的有效能量值应低于1.2kJ/g。由于阿斯巴甜的甜度约为蔗糖的200倍,因此 它的单位甜度能萤值为0.084kJ/g;而纽甜相对于10%的蔗糖溶液,甜度约为 6000倍,它的单位甜度能萤值应小于0._kj/g。与蔗糖的能萤值(16.7kJ/g) 相比,这个值是极小的。
有别于其他C族G蛋A偶联受体的是,甜味受体为异型二聚体。一些研究 人员猜测,TIRs (特别是T1R3)很有可能就是甜味受体,并且可能像其他C族 G蛋白偶联受体一样形成同型二聚体。但是,几个月后,Li等便证明了只有异型 二聚体T1H2 -T1R3才具有甜味受体的功能。T1R3的序列有20%与mGluRs的 相同。在人们发现甜味受体的时期,mGluR8是惟一一种结构已被人们至少部分 了解了的C族G蛋白偶联受体。正是人们对mGluRlN端结构的了解,促成了首 个甜味受体同源模型的建立。类似于mGhiRl,这个模型为两条T1R3链的同型 二聚体。不久后,—个类似的模型表明,T1R3的活性位点可以容纳三个甜度极 高的小分子质量分子。