石拐区海藻糖
经RNA印迹分析知tha基因在各转化体中的转录水平，比对照<4. nidulans的 芦-肌动蛋白的髙。双转化体TB2bl -44 -GD5的嗦吗甜基因转录水平最高， B2-嗦吗甜融合mRNA转录大小为1.9kb，与预计结果相同。以pcbC为启动子 的TCTh -2转化体的表达盒中该DNA片段对应的B2基因5,端只有105bP而不 是其他表达盒中的615bP,因此转录的B2-嗦吗甜mRNA较小（1.4kb)。狹线 印迹分析发现在转化体TGDTh-4、TB2bl -44、TGP -3中的嗦吗甜mRNA水平 在24~48h内最商。转化体TCTh-21 (启动子为pcbC>在整个发酵过程中的表 达水平都很低。
(一)质粒构建
由美国NutraSweet公司开发的阿斯巴甜（Aspartame),是目前有大景供应的 高品质强力甜味剂的典型代表，全世界共有100多个国家批准使用。其甜味纯 正，没有异味，甜味特征几乎与蔗糖一样。阿斯巴甜的问世并付诸实践，为食品 工业的低能量化作出了重大贡献。可口可乐公司由于使用了阿斯巴甜，才成功地 推出髙品质的健怡可乐（低能量型）。
(二）莫奈林的甜味活性中心
关于A环的反应情况尚不清楚，一般认为它可能被氧化成二氧化碳。用 [,4C]标记的二氢查耳酮试验表明除了上面提到的几种酸物质外，大鼠还能代谢 产生其他几种至今仍未被人辨认出的尿代谢物。薄层色谱分析表明，大鼠对用 [,4C]标记的新橙皮苷或经标记的二氢查耳酮的具有放射活性的代谢产物很 相似。
m3-39半乳糖-蔗糖（1)和4-脱氧蔗糖（2)的化学结构
表4 -24 M. vinacea的a -半乳糖苷酶催化甜叶悬钩子苷
在该工艺流程中，PheOMe (L-和D-)的总浓度可能是Z - Asp的2倍。 Z-L- Asp 和 L - PheOMe 缩合形成 Z - L - Asp - L - PheOMe,再和 D - PheOMe形成不溶性复合物，该复合物得率很髙，并在较低PH时分解为Z - L - Asp - L - PheOMe 和 D - PheOMe,可用 Pd 催化 H2还原 Z - Asp - PheOMe 脱 去Z基团。目前还仍未找到合适的微生物脱甲氨基酶，来催化Z-阿斯巴甜的 脱保护反应。
