雁峰区乳糖
在一个长达2年的动物喂养试验中，分别用0%、0.1%、0.3%和1%浓度 的纯度为95. 2%的甜菊苷喂养小白鼠，雄鼠喂养22个月，雌鼠喂养24个月， 然后取雄、雌鼠各10只进行临床和病理学分析。结果表明，0.3%剂量组雄、雌 鼠出现轻微的生长延迟现象，丨％剂量组出现短暂的生长停滞现象，所有试验组 和控制组在总体外观、悄感与行为方面均无多大差异。喂养6个月后尿液、血 液、血生化特性及器官重里发生了一系列的变化，但喂养丨2个月及最终的喂养 结果并没发现这些差别。肿瘤病变与否及其严重性均与甜菊苷的摄人水平没有直 接的关系。
Akiko Shimizu - Ibuka等综合分子动力学和对接模拟的结果，提出了 Neoculin 甜味产生和味迫修饰作用的机制的猜想，如图5 -29所示。Neoculin的结构是处 于打开和闭合的动态平衡的。当降低pH时候，平衡会转向打开的状态，此时， 只有处于打开构象的那部分才可以与hTlR2 -T1R3受体结合。结合于受体的 Neoculin则会改变受体的构象平衡，使之变为活性形式。因此，Neoculin在酸性 条件下可以产生强烈的甜味，而中性条件下，甜味则十分弱。但是，至于pH的 变化是如何影响受体结构，这点研究人员仍未搞清楚，并且在实验过程也没有考 虑这方面的影响。
通过对各种卤代脱氣蔗糖构效关系的研究和比较，可以总结出如下几个 规律：
三、利用呋喃果糖酶改性甜菊双糖苷
(-)嗦吗甜的代谢特性
②分子能够同时缚住两种受体.并激发之产生两种味。
使用产物沉淀法，当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率， 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合，并加人10mg嗜热菌蛋ft酶，起始pH6~8，在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀，该沉淀 得率大于95%。研究还发现，以外消旋化合物为反应底物时，只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe，但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果，Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20)，并在1984年完成了中试。
未反应的环己胺和邻二氣苯用水蒸气蒸出后可以IR新使用，结晶母液套用。 此法原料易得，反应时间短（3h)，收率高（>90%)。我国大部分厂家也采用 此法生产，但是在反应过程中存在易结焦，反应失去控制不易操作等缺点。有人 采用轻油作溶剂，则可以避免此缺点，收率高达97%以上。
用在非水溶性有机溶剂中的闶定化酶催化反应是二相反应体系的-个特例。 在该系统中，多孔载体内部空隙中的缓冲液和在载体外的有机溶剂组成r二相体 系。由于在载体内部的水相体积比有机相体积小，因此由式（2-17)知能增加 平衡常数。5.其他方法
采用电穿孔法，将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究，酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小，使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体（4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度），进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为：2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂，使细胞对渗透压更敏感，因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基，也不能得到CYH抗性菌落，需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后，再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
