九寨沟县木糖醇
近些年来，有-组新型的脲衍生物（Urea NHC0NH(CH,)^00*Na^
培养时间/h
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
图2-21分別表示Z-Asp、PheOMe、Z - Asp - PheOMe的尺值，和饱和乙 酸乙酯水溶液pH关系曲线。P和p尺值固定时，试验结果和由式（2-22)?式 (2-24)算得的结果相吻合（曲线表示计算结果）。表2-6列出以乙酸乙酯为 有机溶剂时不同物质的P和pA：值，P值反映了各物质和有机溶剂相互作用的程 度。表2-6还列出用氣仿和二氣乙烷为有机溶剂时测得的P值。二相体系中的 合成速率可通过速率等式（2-19) ~式（2-21)和分配系数计算式(2-22) ~ 式（2-24)求得。
蔗糖醚化和脱氧衍生物的甜度变化，也证实了以上推断的正确性。如蔗糖的 4 -脱氣、4 -0 -甲基衍生物均有甜味；而当蔗糖分子C -3'位上的羟基被酯化成 3#-0-乙酯蔗糖时，由干掩盖了生甜团的AH基团，因此生成物不具有甜味。这 些结果均与以上确定的蔗糖甜味三角形基团的结论一致。此外还发现，3-酮基-蔗 糖在甜度h和庶糖相似（保留有蔗糖AH、B双官能实体），而蔗糖C-3位上的差向 立体异构体异鹿糖则完全没有甜味。为此，我们甚至可以预测出3-0-甲基蔗糖成 该是甜的，而2 - 0 -甲基蔗糖衍生物如2 -脱氧蔗糖或2 -酮基-蔗糖必然不甜。
挤杻膨胀淀粉时对甜菊苷的转葡糖基得率的影响。酶萤低于900U/g挤IK膨胀淀粉 时，转葡糖基得率随酶摄增加而增加；大于900U/g时，得宇?保持恒定，而环糊 精随酶1：增加反而减少。由于环糊精葡糖基转移酶萤过多会引起一些副反应，如 环糊精水解或歧化反应，而不会增加甜菊苷的转葡糖基得率，因此最佳环糊精葡 糖基转移酶镦为900U/g挤汛膨胀淀粉左右。
阁4-5环糊精葡糖基转移酶转化糖箪化产物的化学结构
六、利用啤酒酵母基因工程法生产嗦吗甜
图5 - 17 电脉冲转化后培养时间对转化率的影响 注：①细胞与切后的pCLRE2混合后泾电脉冲.电脉冲条件：电容25?tF,内? 100011, 场强 0. 5kV/cm。
立体选择性催化氢解纽甜酯的脂肪酶和酯酶可以分别通过黑曲锥(Aspergillus niger)、米曲霉(AspergUlus oryzae)、南极洲假丝酵母（Candida anlarctica)、 柱状假丝酵母(Candida cylindracea)、产朊假丝酵母(Candida utiiis)、娄地靑祗 (Penicillium roqueforti) x 洋葱假第胞菌(Pscudomonas ccpacia)、少根根箱(Rhi- zopus arrhizm )、水生嗜热杆菌（Thermus aquaticus )、小麦胚芽、假单胞菌 (Pseudomonas sp. )、B 型假单胞傲(Pseudomonas sp. type B)、芽抱杆菌(Bacil- lus sp. ) x咕热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)、猪肝、马肝、兔肝以 及酿酒酵母(Saccfmwmyces ce—、等获得。一般脂肪酶首选B型假单胞菌 (Pseudomonas sp. type B)，醋酶首选从猪肝提取（表2 - 26) 0
