台儿庄区低聚木糖
(一）反应原理和步骤
(-)S-6-a合成反应条件的优化
Sun等人成功地在转基因莴苣中获得了重组奇异果索，首次从外源宿主获得 具有生物活性形式的奇异果素。编码奇异果素的cDNA是用R duUifica果肉中的 所有RNA合成的，并被克隆于植物表达载休——PBI121或pBE2113-GUS。载 体pBI121和pBE2113-GUS都含有CaMV35S启动子、胭脂碱合成酶（nos)启 动子和终止子。此外，PBE2113-GUS载体中还含有带翻译增强子（E12-35S- H)的启动子盒。所有这些都被引人A 菌株GV2260。通过感染带载
果浆中的仙茅蛋白不能用水抽提，因此经反复水洗可去除大萤水溶性物质, 然后可以用O.5rnol/L NaCI提取，这样就能明显提高仙茅蛋白的纯化倍数。 0.5mOI/LNaCl提取的提取液无色有甜味，然后经硫酸铵分级，再经CM-Sepha- _柱分离，NaCI线性洗脱后主要成分对应一个尖峰，该峰组分有甜味。加硫 酸铵至约饱和度的80%，得到的沉淀在lOrmnol/L磷酸缓冲溶液中溶解，溶液进 行Sepha(丨exG-100柱凝胶过滤纯化。这样从30g果浆（湿取）可以得到5mg纯 仙茅蛋白（表5-19)，得到仙茅蛋白纯度很高，不溶于去离子水，溶于盐溶液 中，等电点7.1。
有一篇H本专利描述了结合使用酸的钾、钠盐与氨基酸能缩短味觉持续时 间，但该专利不是针对T.donie/Zi〖提取物，而是指姜货属植物。
棉籽糖水解法没有分离上的问题，所使用的《 -半乳糖tT?酶也可以很经济地 获得，并以固定化的形式使用。同时，三氣蔗糖还可以从反应溶剂中被选择性地 结晶出来，从而使反应向正方向进行，并减少回收成本。可惜的是，目前棉籽糖 还未实现工业化生产，它必须从天然糖源（如甜菜糖蜜或棉籽粉）中分离出来， 或经过半乳糖苷酶从半乳糖和蔗糖合成而得，因此无法满足工业化生产三氣 蔗糖对原料棉籽糖的需求。另一个突出的问题是，四氣化棉籽糖的水解速度很 慢，特别是要达到60% ~70%以上的水解率就需要更长的时间。因此，本方法 的经济效益尚体现不出来，目前只有理论上的研究价值。
根据图3-31可知，低温长时间反应有利于S-6-a的形成。但当反应时间 大于6h时，“相对S-6-a值”增长缓慢，继续延长时间对反应对提髙S-6-a 得率并无明显效果，因此选择6h为最佳反应时间。
注：维持时间
1982年，有人最早从Capparis masaikai Levi (当地称为马槟榔）的种子中提 取得到甜蛋白——马槟榔。这种植物生长在中国昆明的亚热带地区，果实有乒 乓球大小，成熟种子用于中药，有甜味，当地人经常食用。马槟榔甜蛋白能引起 持久甜味，相对分子质量11700，等电点pHU.8，在280nm波长有最大吸收峰， 其引起甜味感觉的最低浓度为0. 1%，种仁含甜蛋白量约4%。
表2-39 阿力甜的16种应用范围
