芙蓉区麦芽糖
(二)选择性氣化
莫奈林分子在酸性环境中变性所导致的甜味丧失是可逆的,但在中性或微碱 性环境中发生的变性作用则不可逆。在酸性pH条件下甚至因脲变性而引起的甜 味丧失现象,经中和后也有可能得以恢复。在较高pH下发生的变性作用,由于 形成f二硫键导致莫奈林分子发生积聚作用而沉淀析出,还产生相对分子质虽大 于7_的可溶性无味高聚物,这一过程显然是不可逆的。
在C-6’位上的进一步氣化能提高甜度,制得的4,6^-三氣-4,1',
在双酶-化学联合法中,最值得关注的是优化G-6-a的发酵条件,以及 改善糖和糖酯的分离技术,这将有助于提高该法的效率。因此,脔要对G-6-a 形成过程中的生物化学和生理学机制,进行详细的研究以简化该操作。而快速分 析、良好的反应控制以及适时地终止反应,也是本方法所必需的。如能以蔗糖为 原料经微生物发酵作用直接生成S-6-a,这方法当然非常吸引人,在这方面值 得花大力气加以研究。
图2-8S所示的三种阿斯巴甜类似物均具有强力甜味,其中,图2-88 (1)的甜度为蔗糖的1200倍,图2-88 (2)和(3)均为二肽苄胺,甜度分别 为蔗糖的1300和1500倍。经X射线衍射和核磁共振(NMR)分析,发现图2- 88 (1)在水溶液中有六种构象,两种呈L型,另外四种呈延展型。这六种构象 均对其甜味的产生有贡献,这与图2 -87所示的二肽化合物呈味三维模型所推导 出来的结论完全吻合。
1979年12月,美国国家癌症研究所(NCI)的一份报告认为,通过对9000 人分析表明,人体较长时间(20年)摄人任何形式的糖精下会有增加癌症发病 率的可能,NC1发现那些摄入大萤糖精且食用时间又较长的人其癌症发病率并不 比非使用者髙。还有一份调查表明第二次世界大战期间丹麦人膀胱癌症发病率与 战前20年的没有差别,尽管战争期间人体的糖精摄取量较战前多4?5倍。通过 这些大萤的研究事实均可得出结论认为,没有证据表明糖精与癌症有关。
为检测酵母嗦吗甜是否具有甜味构型开发了 WA检测方法(radioirmmmoassay, 放射免疫分析法)。小鼠接种纯嗦吗甜A后会产生单特异性抗体(monospecific antibodies),它的免疫血淸稀释约50000倍后能选择性地与天然(甜味)构型的嗦 吗甜发生反应,时非天然构型、变性嗦吗甜或嗦吗甜的肽段与抗体的结合能力远不 及天然嗦吗甜。RIA可测定的嗦鸣甜最低浓度为Ing/mL,敏感度约是感官品尝试 验的丨000倍,并且适用范围也更广,对粗提物等都可以测定。将溶于SDS的酵母 嗦吗甜经SDS凝胶电泳分离后转移至硝化纤维滤纸富集,用稀释2000倍的老鼠嗦 吗甜A血清抗体进行检测,发现富集后的变性嗦吗甜及其溶解在SDS中的部分都 能被该血清抗体识别,该被识別组分在电泳中与植物嗦吗甜一起发生迁移。但对酵 母提取物进行RIA分析,没有发现能发生交叉反应的可溶性蛋A质,这可能是由 于酵母细胞内的还原态环境使嗦呵甜的二硫键还原而使蛋A质发生变性沉淀,因而 细胞中就+存在天然水溶性的嗦吗甜。并且由于蛋白质N端没有连接分泌信号序 列,细胞不分泌蛋白质。
奇异果素存在于果浆,不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液(PH10.5)进行提取,这样容易导致变味活 力的下降,而且溶解了多种很难去除的深色物质,无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取,这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定,并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺:冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀,沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙,得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品(表5-18)。
美国Baldwin-Montrose化学公司曾采用此法。此法原料便宜易得,反应条 件温和,但反应操作复杂。日本日东化学公司曾改以环己胺和三氧化硫的气相反 应合成甜蜜素。我国徐光保等采用FJ3N为原料,CH2C,2为溶剂,结晶母液套 用,九次循环试验表明,收率为95.2%。
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