涡阳县低聚果糖
浓度/(g/100mL^ 液）
在我国，有人先后选用了毕赤酵母系统中的分泌型表达载体pPIC 9K及胞内 表达载体PP1C3.5K进行莫奈林表达，结果是，分泌型表达菌株能较高地表达莫 奈林，但没有甜味活性，而胞内表达的英奈林有活性，其产最达到1.8g/L。
许多甜菊苷生产流程均在后道的精制过程中使用f有机溶剂，诸如要去 除一些杂质可选用正丁醇及其醚或酯，有机氣化物或脂肪醇等。要使甜菊苷 结晶析出可选用甲醇或乙醇。结晶甜菊双糖苷A的较好溶剂为70%乙醉。 色谱分离可用多孔性凝胶或有机溶剂。要用色谱法分离出各种单一的双萜苷 可用烷基醇作溶剂。虽然色谱法精制分离效果很好，但还难于在商业化生产 中加以应用，在甜菊苷沉淀过程中，通常结合使用一些有机溶剂以去除色素 及一些杂质，最常见的沉淀剂是氢氣化钙。使用絮凝剂也可去除类似的 杂质。
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(一）嗦吗甜基因的合成
一、甜蜜素的物化性质和甜味特性
每个参数前的系数表明，二肽化合物分子的甜度随分子疏水性和体积的增大而增 加，怛随分子垂直于轴距离的增大而减小。 .
X(% ) =? (l -JY] 100 (2-8)当底物浓度为0. lmol/L时，产物溶解度为0. lfim时，反应平衡得率也达 99.6%，几乎为定量反应。因此加保护基闭降低产物溶解度能够得到很高的平衡 得率，但保护基团必须能够很容易地从产物中脱去。表2 -5所示为几种最常用的保护基团及其稳定或脱去的一般条件。保护某 些肽的氨基的/V-苯乙酰基可用青霉素酰基转移酶（EC3.5. 1.11)催化
Akiko Shimizu - Ibuka首次对Neoculin的三级结构进行了详细的描述。八 条多肽链A至H组成了 AB、CD、EF和GH四个结晶学独立的异型二聚体 (in the asymmelric unit)。肽链 A、C、E 和 G 与 NAS 相对应，肽链 B、D、F 和H与NBS相对应。异型二聚体AB的总体结构如图5-26 (1)所示。亚 基NAS和NBS的结构非常相似。每一原体由3个排列于三棱柱表面的4链 召-折叠组成，并于结构中央附有一 pseudo three - fold axis (處拟三次轴）。 当中的三个折钱都是反平行的，第丨2个/3-链来自于另一个亚基[图5-26
TB2bl -44的产物经纯化后得到三种嗦吗甜组分A、B和C (图5-9), 它们与天然嗦吗甜组成略有区别。这是由于在质粒构建时，在表达盒中采用了 两个串联重复的Lys-Arg序列，使KEX容易识别，从而对B2 -嗦吗甜融合蛋 白进行切割释放嗦吗甜。因此在KRKR序列不同位点切割后产生这三种组分, A组分为嗦吗甜II末端加了一个Arg,占丨8%~20%; B组分为嗦吗甜II末端 加了 LyS-Arg，占75% - 78% ； C组分为嗦吗甜II末端加了 Arg - Lys - Arg, 占3% ~5%。由于TG丨)Th-4上淸液中嗦吗甜的结果相同，这三种形式的纯嗦 吗甜都有甜味。
