嵩县甜菊糖
添加有机助溶剂只增加了 P&,而如果能在P&增加同时减小P&,平衡得 率会增加更多。由Klibanov等人开发的水/有机溶剂二相体系可以实现这一点。 二相中有机相为水不溶性或在水中溶解度很小的有机溶剂，另-相为含酶的水 相。在水溶液中，羧酸和胺大部分以离子形态存在。在这二相体系中，假定溶解 在有机相中的都是非离子形态，且R,、K2没冇可电离的基团，则羧酸和胺的二 相电离平衡常数和可用下式计算：
没有人会想到，从一种粗陋且长期被忽略的植物果实中，提取出的蛋白质化 合物竞然会有甜味，而且很可能是地球上至今为止已发现的最甜的天然物质，更 没有人想到它竟然还有良好的风味改良效果。这种令人惊讶的天然物质就是本章 要重点讨论的嗦吗甜，它巳实现工业化生产并进人实用阶段。
发酵完成后，为了从去除干物质的培养基上清液中有效地提取出G -6 - a, 人们试验了多种溶剂，包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和1 -丙醇等。其中， 甲醇是G-6-a最有效的溶剂，但它同时也会溶解一些葡萄糖，因此要得到纯 净的G-6-a，还必须利用色谱进行进一步分离。以硅胶为固定相，用丙酮对甲 醇提取液进行洗脱可以从中分离出葡萄糖和G -6 - a两个成分并得到纯度为 80% ~85% 的 G-6-a。
庶糖单酯化反应结束后，在体系中加入CHC13可以使S -6 -a及部分其他酯 化副产物迅速结晶析出。但由于没有S-6-a标准物，且未能对蔗糖单乙酯化后 的产物进行充分分离，故未能测出各种反应条件下的S-6-a实际得率。因此图 3 一29 ??图3-31中的纵坐标是以某种参照条件为前提，将该反应条件下得到的 S-6-a在薄层色谱上的斑点面积作为基准（设定为丨），再将其他各种反应条 件下所得的S -6 - a斑点面积和它比较而建立起来的。
在一个系列试验中，将新橙皮苷二氢查3酮分别以5%浓度水平喂养大鼠 22~170d, 5%浓度喂养12个月，或以10%浓度喂养11个月。结果发现10%试 验组动物出现生长受抑制现象。另一试验分别以含0%、0.5%、2. 5%和5.0% 新橙皮苷二氢查耳酮的饲料喂养大鼠2年进行致癌性研究，结果没发现任何与剂 量有关的癌变现象，但5.0%试验组动物的生长速率有所下降。当往这组动物饲 料中添加些矿物质和啤酒酵母时，发现动物生长速度重新增长，100周后就看不 出有什么区别了。在一个三代繁飱试验中没发现摄取二氧查耳酮有任何有害作 用，也未发现任何致畸作用。
对于9种参差构象中主链与旁链形成角度少、p和-的度数已做了铕确计 算，至于剩余键角则作了一些简化的假设。这样计算出的各种构象布居数与 NMR实验数据很一致，如表2-70所示。虽然其他很多构象布居数均占一定的 比例，怛？|01]构象的优先性得以证实。
质粒pCLRM216、pRMll、pUMll的转化体，在lOmLYPD培养基中培养后, 均能产生莫奈林。凝胶定虽扫描表明，奐奈林在pUMll转化体中的表达世，超 过可溶蛋白的50%。以141基因为探针对转化体进行DNA印迹分析，测定 pCLKM216的整合拷贝数为10?丨丨，PRM丨丨为12~丨8，pUMll为20?22。经 DNA印迹分析，确走pKMH和pUMll中没有细菌序列。
甜菊苷的毒理试验于20世纪20年代起源于日本Hokkaido大学，自20世纪 70年代起，日本、美同、韩国和巴西等国家都进行过这方面的研究。
