盐田区AK糖
(-)甜味受体的发现
表2-29 各种食品、饮料中的苯丙氨黢含量
对嗦吗甜基因进行体外突变,或插人合成低聚核苷酸罝换DNA序列或在体 外诱变,得到大量突变基因。这些突变基因克隆至酵母,使其分泌嗦吗甜。大多 数这些带突变基因的质粒能使酵母分泌变异嗦吗甜,但也有些质粒中没有插人使 嗦吗甜分泌的DNA序列,也没有能使嗦吗甜发生折番复性的突变。
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素:间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时,固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时,起始反应速率低且酶不稳定;pH >6时,平衡得率急 剧下降。在大多数情况下,多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定, 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性,但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中,底物和产物浓度各处均 相等。
反应,且沸点较高以保证完全諷化,最好在80弋以上。
③细胞在YPD乎板墒养*或添加40#!!^ CYH的YPD平板培养基丨-的培养时间如图所示。
TB2bl -44的产物经纯化后得到三种嗦吗甜组分A、B和C (图5-9), 它们与天然嗦吗甜组成略有区别。这是由于在质粒构建时,在表达盒中采用了 两个串联重复的Lys-Arg序列,使KEX容易识别,从而对B2 -嗦吗甜融合蛋 白进行切割释放嗦吗甜。因此在KRKR序列不同位点切割后产生这三种组分, A组分为嗦吗甜II末端加了一个Arg,占丨8%~20%; B组分为嗦吗甜II末端 加了 LyS-Arg,占75% - 78% ; C组分为嗦吗甜II末端加了 Arg - Lys - Arg, 占3% ~5%。由于TG丨)Th-4上淸液中嗦吗甜的结果相同,这三种形式的纯嗦 吗甜都有甜味。
令人遗憾的是,尽管该公司在奇异果素的安全毒理评价方面投入了至少 500万美元的巨额资金,最终还是没能满足美国FDA的要求。1974年, FDA发布命令要求该公司产品停止在美国州际之间流通。1977年5月, FDA最终否决了 S. rfufc诉cum的所有产品(包括奇异果索)的食品添加剂地 位。该公司于丨976年开始淸理,停止了奇异果素的商业化进程,直至2008 年情况仍是如此。
美国的糖精制造商PMC Specialties集团有限公司,于1985年购买了原 Sherwin - Williams公司,他们使用比较先进的Maumee合成途径,如图6 - 13所 示。首先在0~51下往氨茴酸钠溶液中添加亚硝酸钠盐(在有硫酸存在条件 下),然后将生成的重氮化物质加到二硫化钠中,酸化之后,结晶析出有机二硫 化物。将收集到的二硫化物洗涤、离心分离并千燥后,在硫酸溶液中使之与甲醇 发生酯化反应。所生成的酯化合物与氣气发生氧化作用转变成邻甲酯基磺酰氣, 再与过景氨作用生成糖精铵,用硫酸中和之即成糖精。
(3)各种水果蜜饯。