宁津县结晶果糖
(一）产物结构和甜味特性用芦-呋喃果糖苷酶在甜菊双糖A苷的丨9位所连葡糖基上引人果糖基后， 甜味特性的变化见表4 - 10。如用细杆菌（—m sp. H - 1 )的芦-呋喃 果糖苷酶在PH6.5, 40弋条件催化蔗糖和甜菊双糖A苷（RA)反应2h，得到果 糖基甜菊双糖A昔（RA-F),果糖基连接在19-0-召-葡糖基的6-0H上
以核糖体蛋白质L41基因为标记，将用32P标记的含C. makosa的RIM - C基 因的Xbal -Sau3AI片段与Candida utUis ATCC9950的基因组DNA进行DNA杂交 分析，结果表明存在一个与KIM - C基因同源的基因。对Candida ut'dis ATCC9950的DNA用Sau3AI进行部分切割后的片段（5~10kb)转人经BamHI 酶切的质粒PBR322构建基因组DNA文库，用RIM - C基W探针对约30 000个 克隆子进行筛选，筛选得到5个正（positive)克隆子，对其中3个质粒构建了 限制性酶切谱图（图5-11)。该同源基W在质粒DNA上的大致位置通过对质粒 的限制性酶切片段进行DNA杂交分析得到。将能与探针杂交的4kb EcoRI片段 双向亚克隆至质粒pBluescript II SK进行DNA序列分析，现已测定广含L41基因 的2086hP的BamHI - SacI片段的DNA序列（图5 - 12),其排序策略如图5-11 所示。
表2-8 各年龄阶段儿童苯丙氨酸的必擗摄取量表2 -9给出日常食品和以阿斯巴甜增甜饮料中的天冬氨酸、苯丙氨酸和甲 醇含量。从中可以看出，假设一瓶以阿斯巴甜增甜的碳酸饮料，其所含的阿斯巴 甜全部被人体代谢吸收，也只含有0.02%天冬氨酸、0.033%苯丙氨和 0.006%的甲醇，而一根香蕉就含有0.112%天冬氨酸、0.041%苯丙氨酸和0.018%甲醉u秘然，在食品中使用阿斯巴甜不会带来任何安全问题。表2-9 日常食品和用阿斯巴甜埔甜的碳酸饮料中天冬氨酸、苯丙氨酸和甲酵的典型含量
(五）Maumee合成法
表2 -7 40<€二相体系中有机溶剂对ZAPM起始合成速率和
以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针，与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照，对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明，在各转化体的表达盒没有发生重 排，各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
例如，在三氯蔗糖中，6-0H和6'-C1间所形成的分子内氢键导致呋喃环 的假旋转和分子内糖苷键C, -0-Cr的轻微转动，使位于果糖基单元的6f-Cl 占据了可与受体活性位点相互作用的位罝，从而有助于三氯蔗糖与甜受体的紧密 结合并提髙甜度。
4.评价潜在神经毒性和免疫毒性的毒理学试验
